




蛋白质在SDS-PAGE电泳中,迁移率只和其分子量相关
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PAGE据其有无浓缩效应,分为连续系统与不连续系统,连续系统电泳体系中缓冲液pH值及凝胶浓度相同,带电颗粒在电场作用下,主要靠电荷及分子筛效应;不连续系统电泳体系中由于缓冲液离子成分、pH、凝胶浓度及电位梯度的不连续性,带电颗粒在电场中泳动不仅有电荷效应、分子筛效应,小型转印电泳槽供应商,还具有浓缩效应,故分离效果更好。不连续的凝胶作为支持介质,利用凝胶层的不连续性、缓冲液离子的不连续性、PH的不连续性及电位梯度的不连续性,使样品在不连续的两相间积聚浓缩成很薄的起始区带,小型转印电泳槽,然后进行分离。
核酸电泳
核酸电泳凝胶的制备和电泳步骤
操作方法如下:
(1) 根据所需要的凝胶的大小将相应的凝胶托盘按正确位置放置在制胶器内;
(2) 称取适量琼脂糖,置电泳缓冲液中,加热使琼脂糖溶解;
(3) 待溶液冷至60℃,加入10mg/ml EB贮存液,使终浓度达0.5mg/ml;
(4) 在距离胶模底板0.5-1mm处放置电泳梳,将琼脂糖溶液倒入胶模中,小型转印电泳槽批发,厚度约3-5mm,注意避免产生气泡;
(5) 凝胶完全凝固后,移去梳子和透明胶,将凝胶放入电泳槽。加入TBE缓冲液使恰好没过胶面约1mm;
(6) 将DNA样品与1/6体积加样缓冲液混合后,加入样品槽中;
(7) 接通电源,使样品槽在负极端,用1-5v/cm的电压,电泳适当时间;
(8) 电泳结束后,可将含EB的凝胶直接放在紫外线检测仪上观察,并拍照记录,也可将不含EB的凝胶在0.5μg/ml的EB溶液中染色30-45分钟,小型转印电泳槽公司,再如上观察和拍照,记录结果。
核酸电泳简史
核酸凝胶电泳分离核酸技术,始于20世纪60年代初。 那时,核酸主要基于沉积速度通过密度梯度离心法进行分离,分离情况由核酸的大小和构象决定。 密度梯度离心法不仅过程耗时,且需重型设备和大量的样品投入。 为寻求突破,研究人员开始探索电场作用下离子或电解液中DNA移动的特征—即 电泳的过程。
通过借鉴已经在蛋白质电泳中使用的技术,核酸电泳进一步发展,开始使用凝胶基质作为分离介质。 早期凝胶电泳实验的分离结果表明了,密度梯度离心分离法(早期确定的核酸分离方法)中沉积系数或 S 值的相关性。 随着20世纪60年代后期对琼脂糖生产的进一步了解和发展,琼脂糖逐渐取代琼脂成为首要选择凝胶电泳介质。
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