龙方科技公司(图)-电泳槽价格-电泳槽

转印电泳的一抗和二抗

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一抗孵育：将LG用稀释液稀释到适当的浓，电泳槽，在摇床上孵育2h（如果做过预实验后发现条带较淡，可以适当降低一抗稀释度或者延长一抗孵育时间）

洗膜：用PBST或者TBST洗膜5 X 5min，如果预实验中发现背景过高，可以增加洗膜时间或洗膜次数

二抗孵育：二抗是辣根过氧化物酶(HRP)标记的LG， 摇床上孵育2h（如果做过预实验后发现条带较淡，可适当降低延长二抗孵育时间）

洗膜：用PBST或者TBST洗膜3 X 10min

T：Tween-20（去污剂）

核酸电泳凝胶的摄影与净化处理

1.凝胶摄影

需配置分辨率较高的照相机，照相机固定架，近摄镜和红色滤光镜以及有机玻璃防护面罩。

操作需在暗室进行，将相机固定好，把凝胶放在紫外检测仪上适当位置，调焦，装上红色滤光片，按常规拍照。

亦可使用凝胶自动处理系统，但仪器费用较高。

2.EB溶液的净化处理

由于EB具有一定的毒性，实验结束后，应对含EB的溶液进行净化处理再行弃置，以避免污染环境和危害***健康。

(1) 对于EB含量大于0.5μg/ml的溶液，可如下处理:

①将EB溶液用水稀释至浓度低于0.5μg/ml;

②加入一倍体积的0.5mol/L KMnO4 ，混匀，再加入等量的25mol/L HCl，混匀，置室温数小时;

③加入一倍体积的2.5mol/L NaOH，混匀并废弃。

(2) EB含量小于0.5μg/ml的溶液可如下处理:

① 按1mg/ml的量加入活性炭，电泳槽价格，不时轻摇混匀，室温放置1小时;

② 用滤纸过滤并将活性碳与滤纸密封后丢弃。

核酸电泳凝胶的制备和电泳步骤

操作方法如下:

(1) 根据所需要的凝胶的大小将相应的凝胶托盘按正确位置放置在制胶器内;

(2) 称取适量琼脂糖，置电泳缓冲液中，加热使琼脂糖溶解;

(3) 待溶液冷至60℃，加入10mg/ml EB贮存液，使终浓度达0.5mg/ml;

(4) 在距离胶模底板0.5-1mm处放置电泳梳，将琼脂糖溶液倒入胶模中，厚度约3-5mm，注意避免产生气泡;

(5) 凝胶完全凝固后，移去梳子和透明胶，将凝胶放入电泳槽。加入TBE缓冲液使恰好没过胶面约1mm;

(6) 将DNA样品与1/6体积加样缓冲液混合后，加入样品槽中;

(7) 接通电源，使样品槽在负极端，用1-5v/cm的电压，电泳适当时间;

(8) 电泳结束后，电泳槽哪家好，可将含EB的凝胶直接放在紫外线检测仪上观察，并拍照记录，也可将不含EB的凝胶在0.5μg/ml的EB溶液中染色30-45分钟，再如上观察和拍照，记录结果。