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机体被微生物感1染后,先产生IgM抗1体,然后产生IgG抗1体。经过一段时间,IgM抗1体量逐渐减少而消失,而IgG抗1体可长期存在,在***痊愈后可持续数年之久。
IgM抗1体一般为保护性抗1体具有***性。因此IgM抗1体的测定,对某些传1染病如甲型肝1炎有较高的临床诊断价值。右图为为甲型肝1炎病1人血1清中IgG抗1体和IgM抗1体出现的时间和水平。
1.3 抗原抗1体反应
1.3.1 可逆性
抗原与抗1体结合形成抗原抗1体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:
Ag Ab→Ag·Ab
抗1体的亲和力(affinity)是抗原抗1体间的固有结合力,可以用平衡常数K表示:
K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab]
Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力抗1体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗1体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗1体。在抗血1清中,特异性的IgG抗1体仅占总IgG中的极1小部分。用亲和层析法提取的特异性抗1体,称为亲和层析纯抗1体,应用于***测定中可得到更好的效果。
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1.3.3 特异性
抗原抗1体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗1体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗1体反应具有高度的特异性。例如乙1肝1病毒中的表面抗原( HBsAg)、e抗原(HBeAg)和核心抗1体(HBcAg),随来源于同一病毒,但仅与其相应的抗1体结合,而不与另外两种抗1体反应。抗原抗1体反应的这种特异性使***测定能在一非常复杂的蛋白质化合物(例如血1清)中测定某一特定的物质,而不需先分离待检物。
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当重要的培养污染时,研究者可能试图消除或控制污染。首先,确定污染物是***、***、支原体或酵母,把污染细胞与其它细胞系隔离开,用实验室***消毒培养器皿和超净台,检查HEPA过滤器。 高浓度的抗1生素和抗霉菌素可能对一些细胞系***性,因而,做剂量反应实验确定抗1生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗1生素如两1性霉1素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是我司推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤:
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