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1．取材
切取的***块不宜太大，以利于固定剂穿透，通常以6mm×6mm×5mm为宜。
注意事项：
（1）取材动作要迅速，不宜作太久的拖延以免***细胞的成分、结构等发生变化。
（2）切片材料应根据需要观察的部位进行选，尽可能不要损伤所需要的部分。
2．固定
将切好的***用生理盐水***洗3次，立即投入10%中性1福尔1马林固定液或4%多聚甲醛中固定，固定36小时。
注意事项：
（1）一般固定液，都以新配为好，配好后应贮存在阴凉处，不宜放在日光下，酶联******盒价格，以免引起化学变化，失去固定作用。
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2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
5. 加酶：每孔加入酶标***50μl，空白孔除外。
6. 温育：操作同2。
7. 洗涤：操作同4。
8. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B050μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
9. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转***）。
10. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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