




电泳实验技术原理
电泳实验的技术原理
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电泳是带电颗粒在电场作用下,向着与其电荷相反的电极移动的现象。在一定pH条件下,每一种分子都具有特定的电荷(种类和数量)、大小和形状,在一定时间内它们在相同电场中泳动速度不同,各自集中到特定的位置上而形成紧密的泳动带。这就是带电粒子可以用电泳技术进行分离、分析和鉴定的基本原理。
带电颗粒在电场中泳动的速度称迁移率或泳动度。
电泳时,带电颗粒(球形)在介质中受力平衡匀速运动,则有:
v = F阻/f = FE/f = E·q/f = E·q/(6π·r·η)
v — 泳动度 F阻 — 颗粒所受阻力
E — 电场强度 q — 颗粒所带电荷
r — 颗粒半径 η — 介质黏度
FE — 颗粒所受电场力 f — 摩擦系数
由上式可见:泳动度与球形分子半径、介质粘度、颗粒所带电荷以及电场强度有关。 非球形分子(如线状DNA)在电泳过程中受到更大的阻力,即粒子的泳动度与粒子形状有关。
琼脂糖水平电泳槽
琼脂糖水平电泳槽实验操作
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1. 根据电泳需要,配置合适浓度的电泳及制胶缓冲液。一般为 1× TAE或0.5×TBE。
注意:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2. 根据制胶量及凝胶浓度,在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中,加入准确称量的琼脂糖粉。
注意:总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量。
3. 在微波炉中加热溶解琼脂糖
注意:必须保证琼脂糖充分完全溶解,否则,会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡,停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4.使溶液冷却至60℃左右,如需要可在此时加入EB溶液使其终浓度为0.5ug/ml,并充分混匀(EB为***品,不提倡使用)。注意:EB是一种致***物质。使用含有EB的溶液时,请戴用手套。EB在可见光下会分解。
5.将琼脂糖溶液倒入制胶托盘中,然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在5-8 mm 之间。
注意:不要产生气泡,溶液温度太高(gt;60℃),会使得水分
过分蒸发,改变凝胶离子浓度,影响电泳效果。
6.在室温下使胶凝固(大约30 分钟),然后放置于电泳槽中进行电泳。
注意:凝胶不立即使用时,用保鲜膜将凝胶包好在4℃下保存,或者放在制胶的缓冲液中,一般可保存2~5 天。
转印电泳槽
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LF-ZY03型 小型转印电泳槽
产品特点:
转印模块上部有导向口,可以保证转印夹顺利卡入。
转印时间短,普通蛋白电泳凝胶转印只需1个小时即可完成,也可进行低强度的过夜转印。
内置专用的蓝冰冰盒,可以快速吸收电泳过程中产生的热量。
槽内转印模块可与LF-Mini2型小型垂直电泳槽的上盖与下槽配套使用。
本产品可以快速、高质量地转印2块电泳凝胶,槽内能容纳2个凝胶转印夹。
技术参数:
转印凝胶面积:75mm×100mm。转印时间:1个小时,也可进行低强度的过夜转印。