




武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
④ 另取洁净的载玻片,捞起展开的切片,使其位于切片1/3处,另一端(磨边,粗糙的一端)磨面上标记或贴上标签,放于切片架上。
10. 脱蜡复水
将温箱温度调至65℃,待温度控制在60℃时,将切片连同切片架放入干燥的温箱内3-5小时至蜡熔化。
之后,石蜡切片经脱蜡透明Ⅰ、Ⅱ脱蜡各20min,勿动(防治***掉)此步为关键步,请轻拿轻放。然后放入100%、95%、90%、80%、70%各级酒精溶液中各5min
11. 染色
切片放入苏1木1精中染色约10-30min。
染色时间应根据染色剂的成熟程度及室温高低,适当缩短或延长。室温高时促进染色,染色时间可短些,否则可适当延长时间,冬季室温低时可放入恒温箱中染色。
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6.***样本如何处理?
用预冷的PSB (0.01M,pH=7.4)冲洗***,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将***剪碎。将剪碎的***与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的***样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑1制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解***细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,FE***盒,或反复冻融。***后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟,取上清检测。
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6.酶***测定
酶***测定(enzymeimmunoassay)可分为均相(homogenous)和非均相(heterogenous)两种类型。在均相E0IA中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下,抗原抗1体反应后形成的酶标记抗原抗1体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相E0IA在临床检验中较少应用。非均相E0IA需***行游离的和结合的标记物的分离。如前所述,固相载体可用作一种分离手段。这种固相酶***测定方法在1971年***1初建立时称为酶联***吸附剂测定(enzymelinked immunosorbent assay),简称ELISA,在国内有译作酶联***吸附试验的,虽然含义不完全确切,但已习用。
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