琼脂糖水平电泳槽
琼脂糖水平电泳槽实验操作
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1. 根据电泳需要，配置合适浓度的电泳及制胶缓冲液。一般为 1× TAE或0.5×TBE。
注意：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2. 根据制胶量及凝胶浓度，在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中，加入准确称量的琼脂糖粉。
注意：总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量。
3. 在微波炉中加热溶解琼脂糖
注意：必须保证琼脂糖充分完全溶解，否则，会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡，停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4.使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时加入EB溶液使其终浓度为0.5ug/ml，并充分混匀（EB为***品，不提倡使用）。注意：EB是一种致***物质。使用含有EB的溶液时，请戴用手套。EB在可见光下会分解。
5.将琼脂糖溶液倒入制胶托盘中，然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在5－8 mm 之间。
注意：不要产生气泡，溶液温度太高(gt;60℃)，会使得水分
过分蒸发，改变凝胶离子浓度，影响电泳效果。
6.在室温下使胶凝固（大约30 分钟），然后放置于电泳槽中进行电泳。
注意：凝胶不立即使用时，用保鲜膜将凝胶包好在4℃下保存，或者放在制胶的缓冲液中，一般可保存2～5 天。
转印电泳
转印电泳的分类及注意事项：
Western Blotting（蛋白质单项电泳后印迹转移）
Eastern Blotting（蛋白质双向电泳后印迹转移）
Southern Blotting（DNA印迹） Northern Blotting（RNA印迹）
在转印过程中要控制温度 ，在低温或者冷循环条件下进行
对于分子量大于100KD的蛋白质大分子不用半干转
北京龙方科技***生产、销售电泳槽，以下信息由龙方科技为您提供。
蛋白电泳
蛋白电泳中蛋白样品的分子结构
蛋白质分子结构可以分为4级：
一级结构：组成蛋白质多肽链的线性氨基酸序列。
二级结构：依靠不同氨基酸之间的C=O和N-H基团间的
氢键形成的稳定结构，主要为α螺旋和β
-折叠，β-转角，无规卷曲
三级结构：通过多个二级结构元素在三维空间的排列
所形成的一个蛋白质分子的三维结构。
四级结构：用于描述由不同多肽链（亚基）间相互作
用形成具有功能的蛋白质复合物分子。
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