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4）加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。在临床检验中，此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗1体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗1体的来源为抗血1清，包被和酶标用的抗1体***1好分别取自不同种属的动物。如应用单克1隆抗1体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，ROS ELISA***盒，而且可以将受检标本和酶标抗1体一起保温反应，作一步检测。
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在一步法测定中，当标本中受检抗原的含量很高时，过量抗原分别和固相抗1体及酶标抗1体结合，而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象，此时反应后显色的吸光值（位于抗原过剩带上）与标准曲线（位于抗1体过剩带上）某一抗原浓度的吸光值相同（参见1.3.2，图1-4），如按常法测读，所得结果将低于实际的含量，这种现象被称为钩状效应（hook effect），因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时，反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法***测定标本中含量可异常增1高的物质（例如血1清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）时，应注意可测范围的***1高值。用高亲和力的单克1隆抗1体制备此类***可削弱钩状效应。
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当重要的培养污染时，研究者可能试图消除或控制污染。首先，确定污染物是***、***、支原体或酵母，把污染细胞与其它细胞系隔离开，用实验室***消毒培养器皿和超净台，检查HEPA过滤器。 高浓度的抗1生素和抗霉菌素可能对一些细胞系***性，因而，做剂量反应实验确定抗1生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗1生素如两1性霉1素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是我司推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤：
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