




武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免1疫学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免1疫学等生命科学领域。
1. 在无抗1生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。
2. 分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗1生素加入到每一个孔中。例如,两1性霉1素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。
3. 每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。
4. 确定抗1生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2~3倍浓度的抗1生素的培养液培养细胞2~3代。
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当重要的培养污染时,研究者可能试图消除或控制污染。首先,确定污染物是***、***、支原体或酵母,把污染细胞与其它细胞系隔离开,用实验室***消毒培养器皿和超净台,检查HEPA过滤器。 高浓度的抗1生素和抗霉菌素可能对一些细胞系***性,因而,做剂量反应实验确定抗1生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗1生素如两1性霉1素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是我司推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤:
武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
3. 洗涤
材料经固定后,PBS或双蒸水冲洗约3小时。(20,30,30,60)
4. 脱水
材料依次经80%、90%、100%、100%各级乙醇溶液脱水,各30min
注意事项:
(1)脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。
(2)在更换高一级的脱水剂时,elisa***盒价格,***1好不要移动材料以免损坏,可用吸管吸出器皿中的脱水剂,再用吸水吸尽器皿内剩余液,然后于皿中加入高一级脱水剂。
(3)在低浓度酒精中,每级停留不宜太长,否则易使***变软,助长材料的解体。
(4)在高浓度或纯酒精中,每级停留的时间也不宜太长,否则会使***变脆,影响切片。
(5)如需过夜,应停留在80%酒精中。
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