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什么是电泳

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分子生物学中，电泳是应用广泛的技术，从首代***测序技术的发明，到各种DNA分子以及蛋白质的分离、鉴定，无不用到了电泳。

顾名思义，电泳就是在某种介质中，通过电流使物质像游泳一样移动，在生物学对电泳的明确定义是带电粒子在电场的作用下，向相反的电极移动，并利用带电粒子在电场中迁移速度不同以达到分离目的的技术。简单来说，电泳就是将DNA或蛋白质在电场中通过介质的分子筛效应将不同分子量的分子进行分离的技术。

电泳用琼脂糖多为粉状物，不带电荷，凝点30°C，略高于室温，转印电泳槽批发，使用时需现用现配，溶质需和电泳时所使用的电泳缓冲液液一致；配置琼脂糖凝胶时，会有专门的制胶板(图1)和梳子(图2，用来预留点样孔)来制作凝胶块，配置凝胶时会加入荧光染料(部分荧光染料会有微毒，使用时应小心谨慎！)，免去电泳后染色的步骤。

DNA电泳技术原理

根据DNA分子量不同，采用外加电场使其分开，转印电泳槽，用EB嵌入DNA分子后在紫外下显色。

琼脂糖凝胶电泳是利用琼脂糖溶化再凝固后能形成带有一定孔隙的固体基质的特性。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。

1） 在电场的作用下及中性pH的缓冲条件下，带负电的核酸分子向正极迁移。由于糖一磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速度向正极方向移动。

2） 在一定的电场强度下，DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应，即DNA分子本身的大小和构型。具有不同的相对分子质量和不同构型的DNA片段泳动速度不一样，可进行分离。

3） ***化乙锭在紫外光照射下能发射荧光，当DNA样品在琼脂糖凝胶中从负极向正极泳动时，***化乙锭从正极向负极移动，这样***化乙锭分子就会嵌入DNA分子中形成络合物，使DNA在紫外光下发射很强的荧光。在***化乙锭足够的情况下，荧光的强度正比于DNA的含量，这样就可以检测DNA的浓度。

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转印电泳湿转方式的操作介绍

湿转（一般是恒压转印，100V，时间2h左右）：转印缓冲液，三明治结构 ，底层海绵，往上依次是3-4层滤纸，凝胶，转印电泳槽报价，膜，3-4层滤纸，海绵

海绵和滤纸在使用前要用转移液浸泡，在制作三明治结构时一定要避免凝胶干燥，转印电泳槽厂商，滤纸内的气泡要用玻璃棒赶走

膜在用之前都要活化，PVDF膜要先浸泡5S-30s，然后在转移缓冲液中平衡，目的是活化膜上的正电基团，NC膜直接在转移液中平衡即可

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