ATP含量测定
ATP含量通过之前发表的方法测量(Li et al.， 2014)。简言之，1ml 发酵液加4ml水，4℃12000g离心10分钟，沉积细胞加入200 μL裂解缓冲液再次混悬置于4℃。ATP浓度测定基于ATP检测***盒使用手册，换算成单位细胞干重的ATP含量
分析方法
是由水杨酸法测定的。盐有先前Nicholas和Nason的重氮偶联法测定 。采用气相色谱测定乙二醇和的含量(Qiu et al.，2016)。维持系数是根据以前发表的方法确定的(Liu et al.， 2014). 采用Pirt模型对维持系数进行测量如下:
qglc = μ/Ymax mglc.
其中qglc为比葡萄糖消耗速率(mmol/g DCW/h)， μ是比生长速率，Ymax是产量（(g DCW/mmol)，地衣芽孢***报价， mglc.是维持系数(mmol/gDCW/h).
饲料添加用量:(200亿cfu/g)
饲料添加用量:（200亿cfu/g）
1.按全价饲料添加本产品计算：乳猪：500-800克/吨；仔猪、生长猪、育肥猪：300-500克/吨；种蛋禽：300-600克/吨；肉禽：200-500克/吨；反刍：1000-2000克/吨；
2．饮水用量：
按250-500倍稀释自由饮水。
3．饲料加工：按0.2-0.5％（***多发期1％）均匀拌入原料中，加工制粒。
4.成品饲料：按0.2-0.5％量（***多发期1％）用粘合物（如鸡蛋、油脂、粘合剂）与颗粒饲料或冰鲜鱼块（糜）混合均匀，使地衣芽孢***粘附在其表面，晾干后即可投喂。
地衣芽孢***中***整合
为了构建同时过表达vgb， adK，地衣芽孢***厂家， 和 resD***的菌株，按照之前发表的方法将P43启动子介导的单个***整合到地衣芽孢***的染色体中(Cai， Wang， et al.， 2017). 通过菌落PCR和DNA测序对重组菌株进行验证
测定细胞生物量，γ-PGA产量和葡萄糖
细胞生物量通过细胞干重来测量。γ-PGA浓度通过液相色谱参照之前描述的方法完成(Wang，济南地衣芽孢***， Yuan，地衣芽孢***厂， Wei， Chen， amp; Chen， 2015). 葡萄糖浓度通过SBA-40C生物分析仪测定。
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