




武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
三.实验材料
仪器设备:1.酒精灯、三角烧瓶,培养皿;2.镊子、剪刀、剖针;3.双筒解剖显微镜;4.光照培养箱或温室;
材料烟1草无菌苗、豌豆幼苗。
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(1)MS培养基,植物激1素:NAA、6-BA等;
(2)饱和漂液(次氯1酸钠);
(3)70%酒精、100%酒精、酒精棉球;
(4)无菌水
四.实验步骤
豌豆苗的茎尖培养
⑴取发芽6天的豌豆幼苗10株,简取1厘米左右的茎尖,浸入70%的酒精中1分钟,再浸入饱和次氯1酸钠溶液中消毒15分钟,(此步以后要求无菌)用无菌水中冲洗5次,在灭菌的滤纸上吸干水分,放入灭菌的培养皿中。
2. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
5. 加酶:每孔加入酶标***50μl,空白孔除外。
6. 温育:操作同2。
7. 洗涤:操作同4。
8. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B050μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
9. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转***)。
10. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
心肌细胞首先合成108个氨基酸的BNP原,称之为proBNP(BNP前体)。在受到心肌细胞的刺激后(例如,心肌细胞拉伸),proBNP在蛋白酶作用下列解为NT-proBNP(氨基末端- proBNP或N端-proBNP)和生物活性激1素BNP。两种多肽都释放进入血循环。(4)在高浓度或纯酒精中,每级停留的时间也不宜太长,否则会使***变脆,影响切片。两者来源相同并且等摩尔分泌。
BNP与NT-proBNP的不同点主要有如下几点: