分配层析在支持物上形成部分互溶的两相系统。一般是水相和有机溶1剂相。常用支持物是硅胶、纤维素和淀粉等，这些亲水物质能储留相当量的水。被分离物质在两相中都能溶解，但分配比率不同，展层时就会形成以不同速度向前移动的区带。
离子交换层析支持物是人工交联的带有能解离基团的有机高分子，如离子交换树脂、离子交换纤维素、离子交换凝胶等。带阳离子基团的，层析泵，如磺酸基（—SO3H）、羧（—CH2COOH）和磷酸基等为阳离子交换剂。带阴离子基团的，如DEAE—（二胺）和QAE—（四级胺）等为阴离子交换剂。离子交换层析只适用于能在水中解离的化合物，包括有机物和无机物。对于蛋白质、核酸、氨基酸及核苷酸的分离分析有的分辨力。离子交换基团在水溶液中解离后，能吸引水中被分离物的离子，各种物质在离子交换剂上的离子浓度与周围溶液的离子浓度保持平衡状态，各种离子有不同的交换常数，K值愈高，被吸附愈牢。洗脱时，增加溶液的离子强度，如改变pH，增加盐浓度，离子被取代而解吸下来。洗脱过程中，按K值不同，分成不同的区带。
离子交换剂分三部分:高分子聚合物基质电荷基团 平衡离子凝胶层析:又称分子筛过滤、排阻层析等。它的突出优点是层析所用的凝胶属于惰性载体，不带电荷，吸附力弱。操作条件比较温和。可在相当广的温度范围下进行，不需要有机溶1剂，并且对分离成分理化性质的保持有独到之处。对于高分子物质有很好的分离效果。
凝胶层析原理:大分子物质沿凝胶颗粒间隙随洗脱液移动，流程短，流速快先被洗出层析柱，而小分子相反从而达到分离效果
固定相:色谱分离过程中的一-个固定的介质。
流动相:在层析过程中推动固定相上待分离物质朝--个方向移动的液体气体或超临界流体等
色谱分离的共同点: (1) 存在流动相固定相(2) 物质的分离还必须借助流动相的移动来推动(3) 差速运动分离原理
迁移率: (比移值)指在一定条件下，在相同时间内某一组分在固定相移动的距离与流动相本身移动距离的比值。
Rf值与分配系数K密切相关: k大Rf小.
分配系数影响因素: (1)被分离物的本身性质(2)固定相流动相的性质(3)层析柱的温度
正向色谱:固定相极性大于流动相的极性
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