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　　胎牛***使用方法：在细胞培养过程中，经常加入5%-20%的胎牛***，常使用的澳洲胎牛***浓度是10%。高浓度的***可能改变细胞的***表达谱，影响后续实验的结果，我们在实验中使用10%的澳洲胎牛***培养293T细胞，效果非常好。但是有些细胞也会使用5%的Gibco FBS或者20%的澳洲胎牛***，要根据具体 细胞选择合适的澳洲胎牛***浓度。

***中的沉淀物对细胞培养有什么影响？污染。磷酸钙往往被误认为微生物污染而引起争duan，研究者可能会在***中观察到一些 絮状的沉淀，因此就会比较警觉的去做无菌试验，将***放在培养箱中培养几天，结果可能会观察到更多的絮状沉淀，因此就断定***被污染了。并且当研究者将***样品放在倒置显微镜下观察时往往可以看到一些可以运动的小黑点，因此就更加确认是***被污染了。于是，研究者就会花费更多的时间和精力来和生产商确认，但***终确定***没有被污染而只是沉淀。为了避免这些问题的发生，我们建议不要直接将***放在培养箱中培养观察是否有菌，而是将***加到琼脂板上进行培养以观察是否有***生长。另外，也可以进行革兰氏染色，在油镜下观察，以确认是否有污染。

如何避免***中沉淀物的出现？

首先要注意正确的***解冻步骤，而且溶解过程中一定要每隔一段时间均匀而缓慢的摇动***。我们已经发现在下列情况下沉淀物可能增加，使用中应该尽量避免：（1）热灭huo***；（2）在 37℃下培养***；（3）反复冻融；（4）γ射线照射；（5）长期储存在 2-8℃；（6）在室温下放置时间过长。

如何去除***中的沉淀？

如想去除这些絮状沉淀物，可以将***分装到无菌离心管中，以 400g 离心，上清液即可直接加入到培养基内一起过滤。注意：不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物，因为这可能阻塞滤膜。