




转印电泳的一抗和二抗
转印电泳的一抗和二抗
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一抗孵育:将LG用稀释液稀释到适当的浓,在摇床上孵育2h(如果做过预实验后发现条带较淡,可以适当降低一抗稀释度或者延长一抗孵育时间)
洗膜:用PBST或者TBST洗膜5 X 5min,如果预实验中发现背景过高,可以增加洗膜时间或洗膜次数
二抗孵育:二抗是辣根过氧化物酶(HRP)标记的LG, 摇床上孵育2h(如果做过预实验后发现条带较淡,可适当降低延长二抗孵育时间)
洗膜:用PBST或者TBST洗膜3 X 10min
T:Tween-20(去污剂)
电泳原理
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1、(分解)
---在外加直流电场的作用下,水在两极会发生电解反应。在阳极,形成H 极区,便于涂料沉积。
2.电泳(泳动、迁移)
阴离子树脂及OH-在电场作用下,向阳极移动,而阳离子向阴极移动的过程.
3.电沉积(析出)
在阳极被涂工件表面,阴离子树脂与阳极表面酸性离子作用,形成树脂沉积物而析出,沉积于被涂工件表面.
4.电渗(脱水)
工件表面上的涂膜具有多数毛细孔结构,水通过内渗透力从阳极涂膜中排渗出来,在电场作用下,引起涂膜脱水,而涂膜则吸附于工件表面,从而完成整个电泳过程.
5.ED离子交换原理
蛋白电泳槽参数
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感谢您使用LF系列产品,为了保证您在使用过程中能够正确操作,请您仔细阅读本说明书。
功能概述
本产品适用于生物技术行业中的小型聚丙烯酰胺凝胶电泳。
凝胶面积(W×L):8.3cm×7.3cm
加样梳:10(齿)、15(齿) 凝胶厚度:1.0mm、1.5 mm缓冲液容积:2 块胶 700 毫升;4 块胶 1000 毫升。
核酸电泳槽操作与***
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核酸电泳操作:
1、待凝胶聚合后,轻轻拔掉加样梳(注意:先拔一侧,否则垂直拔出会使胶孔产生真空,导致部分凝胶被带出加样孔),把凝胶托盘连同凝胶一起移入电泳槽中。
2、在电泳槽中加入电泳缓冲液,使凝胶全部被浸没,液面应高出胶面1.5mm—2mm左右。
3、在拔掉样品梳之后留下的加样孔内加样,在加样时要注意避免引入气泡。
4、盖好上盖,接通电泳仪电源,注意不要接错正负极。
5、根据实际情况选择适宜的电泳电源参数进行电泳,长胶需较高电压,采用高电压所需电泳时间较短,但发热高,分辨率低,适合筛选样品或检查样品纯度;反之,低电压,发热少,分辨率高,但耗费时间较长。
6、电泳实验结束后,先关闭电泳电源,随之拔出电泳槽导线(1红1黑),取出凝胶托盘。
日常维护与***
包装后的产品贮存环境温度应在- 40℃~55℃、相对湿度不超过93%、无腐蚀性气体和通风良好的室内。
使用时注意保持电泳槽的清洁,可用海绵沾少许洗涤剂清洗,再用无离子水冲洗干净,放在无灰尘处晾干备用。
备注:本产品的凝胶托盘上具有荧光刻度线,便与紫外观察。