




武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的,如血1清、血浆、尿液、细胞培养上清或***匀浆液等,不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的步,下面简单介绍一下不同类型的样本的处理方法。1、 血1清
血1清是1常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。
用无热原、无内毒1素的试管或离心管采集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜,使血1清析出。(1好将试管或离心管倾斜放置,使液面横截面增大,能使血1清更大程度的析出。)4℃ 1000×g离心20分钟,仔细收集上清。建议将血1清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
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1、染色过强 原因 解决办法 抗1体的浓度过高或抗1体孵育时间过长 降低抗1体滴度(一般指浓缩性抗1体)抗1体孵育时间:室温1 小时或4℃过夜 孵育温度过高,孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ DAB 显色时间过长或 DAB 浓度过高 显色时间不能超过5-10分钟,以显微镜下观察为准 2、非特异性背景染色 原因 解决办法 操作过程中冲洗不充分 每步冲洗3×5 ***中含过氧化物酶未阻断 可再配置新鲜3%H2O2封闭,孵育时间延长 ***中含内源性生物素 正常非***动物血1清再封闭 血1清蛋白封闭不充分 延长血1清蛋白封闭时间
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2) 激1素,包括小分子量的甾体激1素等。
3) 抗生1素和药1物。
4) 病原体抗原,HBsAg、HBeAg等。
5) 另外,也可利用纯化的抗原检测标本中的抗1体,例如抗-HBs等。
5.标记的***测定
如上所述,***测定是一种很敏感的测定方法,酶联******盒现货,抗原抗1体反应后直接测定形成的沉淀或浊度,敏感度可达5~10μg/ml,但在临床检验中,某些待测物在标本中的含量远低于这一水平,因此要寻找增加敏感度的方法。标记的***测定是将检测***中的抗原或抗1体用可微量测定的物质加以标记,通过测定标记物来提高敏感度。在放1射***测定和酶***测定中,标记物分别为放1射性核素和酶,后用测定放1射性和酶活力来计算待检物的量,敏感度可比直接测定沉淀物提高数百至数千倍。在标记***测定中,一般加入过量的标记***以保证与待测物彻底反应。以标记抗1体(Ab ※)检测抗原(Ag)为例,反应式如下:
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