




武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
实验目的
植物细胞和***培养的技术性强,要求无菌操作,通过本实验可初步掌握常规的***培养技术,加深对无菌操作的了解。
二.实验原理
植物的性:植物体的任何一个细胞都具有生长分化成为一个完整植株的能力,称为植物的性。
植物***培养就是利用植物的性进行离体无菌植物培养的一门技术。植物***培养按其原始意义,就是指愈伤***培养。但发展至今,其范围日益扩大,FE***盒,已包括植物和它的离体器1官、***、细胞和原生质体的离体无菌培养。因此,拥有几种不同水平的培养技术,即整体的、器1官的、***的、细胞的和原生质的培养技术。
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6.透蜡
放入二甲本和石蜡各半的混合液60min,再放入石蜡Ⅰ60分钟、石蜡Ⅱ透蜡30分钟。
透蜡的目的是除去***中的透明剂(如二甲本等),使石蜡渗透到***内部达到饱和程度以便包埋。透蜡时间根据***大小而定。透蜡应在恒温箱内进行,并保持箱内温度在55-60℃左右,注意温度不要过高,以免***发脆。一般置于恒温箱0.5h。
透蜡注意事项
(1)尽量保持在较低温度中进行,以石蜡不凝固为度;
(2)透蜡温度要恒定,不可忽高忽低;
(3)操作要迅速,力求在1短的时间内完成石蜡透入过程,以免引起***变硬、变脆、收缩等。
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12.水洗
用自来水流水冲洗约15min。使切片颜色变蓝(或放入碱性水中也可),但要注意流水不能过大,以防切片脱落。
13.分化
将切片放入1%盐酸乙醇液中褪色,约2秒至数十秒钟。见切片变红,颜色较浅即可。
14.漂洗
切片再放入自来水流水中使其***蓝色。
15.脱水Ⅰ
切片入50%乙醇→70%乙醇→80%乙醇中各5min。
16、复染
用0.5%伊红乙醇液对比染色1-3min。
伊红主要染细胞质,着色浓淡应与苏1木1精染细胞核的浓淡相配合,如果细胞核染色较浓,细胞质也应浓染,以获得鲜明的对比。反之,如果细胞核染色较浅,细胞质也应淡染。可在伊红乙醇液中滴加数滴冰醋酸助染,促使细胞质容易着色,并且经乙醇脱水时不易褪色。
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