其基本原理是：在细胞或***结构保持不变的条件下，用标记的已知的RNA核苷酸片段，按核酸杂交中碱基配对原则，与待测细胞或***中相应的***片段相结合（杂交），所形成的杂交体 (Hybrids）经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的mRNA、rRNA和tRNA分子。荧光原位杂交（Fluorescenceinsituhybridization，FISH）是20世纪80年代末在性原位杂交技术基础上发展起来的一种非性分子生物学和细胞遗传学结合的新技术，是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。RNA原位杂交技术 经不断改进，其应用的领域已远超出DNA原位杂交技术。武汉迈斯普生物科技有限公司是一家***从事生物***技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷，由3位归国博士领衔创办。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色，依托光谷生物城技术产业优势，面向***提供的生物技术服务。尤其在***分析和诊断方面能作定性、***和定量分析，已 成为的分子病理学技术，同时在分析低丰度和罕见的mRNA表达方面已展示了分子生物学的一重要方向。FISH是原位杂交技术大家族中的一员，因其所用探针被荧光物质标记（间接或直接）而得名，该方法在80年代末 被发明，现已从实验室逐步进入临床诊断领域。基本原理是荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在退火 温度下复性；通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象（即维持其原位）的前提下对靶核酸进行分析。武汉迈斯普生物科技有限公司是一家***从事生物***技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。武汉迈斯普生物科技有限公司是一家***从事生物***技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷，由3位归国博士领衔创办。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色，依托光谷生物城技术产业优势，面向***提供的生物技术服务。通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象（即维持其原位）的前提下对靶核酸进行分析。
原位杂交技术发展史
原位杂交技术(In situ hybridization，ISH)是由分子生物学、***化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术，始于20世纪60年代。
1969年美国耶鲁大学的Gall等(1969)首先用爪蟾核糖体***探针与其卵母细胞杂交，将该***进行***，与此同时Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相继利用同位素标记核酸探针进行了细胞或***的******，从而创造了原位杂交技术。如内源性的POD可通过含1%H2O2的甲醛溶液处理30min。
自此以后，由于分子生物学技术的迅猛发展，特别是20世纪70年代末到80年代初，分子、质粒和噬菌体DNA的构建成功，为原位杂交技术的发展奠定了深厚的技术基础。
原位杂交在前。
（1）常规脱蜡入水。
（2）37℃蛋白酶K消化20min，37℃漂洗液充分洗去蛋白酶K。
（3）滴加探针，加盖玻片，避光、湿盒、37℃过夜孵育。
（4）如果***盒允许的话，将***盒中洗脱液水浴加温至37℃震荡洗脱多余的探针。
（5）加碱性磷酸酶标记的抗1体，37℃孵育半小时，洗去抗1体后显色。
免1疫组化在后。
（1）将显色后确认为阳性的切片充分漂洗。
（2）在PH为6.0的枸橼酸钠溶液中，微波至96℃左右，作用10min。
（3）滴加一抗，37℃湿盒孵育2h。
（4）充分漂洗切片，滴加二抗，室温下孵育40-50min。
（5）DAB显色后，采用PBS中止显色反应。
（6）不要复染核，不然就盖住原位杂交信号了。