***盒有以下三大特点:
1、快速,操作简便,从样品处理到结果读取只需20分钟。
2、灵敏度高,较低浓度可达到10拷贝每微升。
3、特异性强,能将新冠与其他冠状病毒区分开,避免假阳性。
目前市面上的核酸检测仍是传统的荧光定量PCR方法,需要采取病毒提取、反转录、荧光定量扩增等多重操作,总体时间需要3小时以上。且,病毒提取方法需要多步骤处理样品,操作复杂,检测人员被染上的风险高。
该病毒可接触传播,飞沫传播,更可怕还可通过气溶胶传播,一旦足够浓度病毒暴露在空气中,就有可能造***员污染。所以,我们认为***急需一种能尽量减少检测人员对样品的接触操作,分子扩增快速,避免样品长时间暴露在空气中的新方法。
对此,团队不仅设计上述快速检测***,还开发出“超快速一步法传***样本处理方案”。该方案是集“样本保存”、“咽拭子采集”和“核酸释放”一体的快速样本前处理***,非常适合传***的样本采集,运输以及核酸提取。。
检测前仅需将装有待测样本液(浸泡过病毒样本的***液)的试管在沸水中浸泡10分钟,则进一步灭活病毒样本的同时,完成了待测前的处理。不仅进一步保护了检测人员,且无需依赖任何核酸提取设备。保证了全部检测流程仅需30分钟不到。
自主研发用时,引物设计需注意!
核酸试纸条三明治夹心检验法探针设计:在上下游引物中间设计一条长度为46-52nt与目的片段互补序列;5’端修饰一个抗原标记(典型FAM);5’端和3’端中间位置标记一个dSpacer(THF);3’端标记一个修饰基团,如胺基、生物素或C3-Spacer,同时要求下游引物5’端标记一个修饰基团。
该方法极其适用于现场核酸检测。可应用于初筛、食品安全、宠物***检测等各种不具备完整分子检测条件下的核酸测试。对操作人员***水平要求低,检测结果可信度高。
安普未来的解决方案操作十分简单
1核酸提取
直接取咽拭子等样品放入管A中(含裂解液,可灭活病毒);
管A放入95℃-100℃水浴或者金属浴10分钟;2扩增反应
向含有冻干***(冻干***包含了生物酶与各反应组分;可常温运输,便捷)的反应管中加入42.5 μL R buffer使其复溶;
取核酸提取步骤中提取完成的样本3-5μL 加入反应管;
然后在反应管加入2.5μL启动B buffer,盖上盖充分混匀后上机反应。反应温度为42℃,时长20min,实时显示荧光扩增曲线。其结果分析与荧光定量PCR类似,简单易懂。