***盒有以下三大特点:
1、快速,操作简便,从样品处理到结果读取只需20分钟。
2、灵敏度高,较低浓度可达到10拷贝每微升。
3、特异性强,能将新冠与其他冠状病毒区分开,避免假阳性。
目前市面上的核酸检测仍是传统的荧光定量PCR方法,需要采取病毒提取、反转录、荧光定量扩增等多重操作,总体时间需要3小时以上。且,病毒提取方法需要多步骤处理样品,操作复杂,检测人员被染上的风险高。
该病毒可接触传播,飞沫传播,更可怕还可通过气溶胶传播,一旦足够浓度病毒暴露在空气中,就有可能造***员污染。所以,我们认为***急需一种能尽量减少检测人员对样品的接触操作,分子扩增快速,避免样品长时间暴露在空气中的新方法。
对此,团队不仅设计上述快速检测***,还开发出“超快速一步法传***样本处理方案”。该方案是集“样本保存”、“咽拭子采集”和“核酸释放”一体的快速样本前处理***,非常适合传***的样本采集,运输以及核酸提取。。
检测前仅需将装有待测样本液(浸泡过病毒样本的***液)的试管在沸水中浸泡10分钟,则进一步灭活病毒样本的同时,完成了待测前的处理。不仅进一步保护了检测人员,且无需依赖任何核酸提取设备。保证了全部检测流程仅需30分钟不到。
突破传统桎梏,将分子检测带入一个新领域
具体操作方法如下:
1. 采用我司自主开发的快速核酸释放剂提取核酸(核酸释放剂与样本混匀,室温静置5分钟即可取上清作为核酸模板),或者采用市场常见“离心柱法”和“磁珠法”提取核酸作为模板亦可;
2. 取上述模板2μL加入到复融后的反应液中,通过上述各种加热手段,保证加热温度在37°~42°之间10分钟即可。
3. 上述反应时间结束后,向反应液中加入少许无菌水稀释,后直接插入试纸条,则马上可通过试纸条上的条带颜色变化,从而判定阴阳性。
? 自主研发用时,引物设计注意事项:
核酸试纸条三明治夹心检验法探针设计:在上下游引物中间设计一条长度为46-52nt与目的片段互补序列;5’端修饰一个抗原标记(典型FAM);5’端和3’端中间位置标记一个dSpacer(THF);3’端标记一个修饰基团,如胺基、生物素或C3-Spacer,同时要求下游引物5’端标记一个修饰基团。
再次突破!安普未来较快8分钟完成核酸检测实验具体操作
采用我司自主开发的快速核酸释放剂提取核酸(核酸释放剂与样本混匀,室温静置5分钟即可取上清作为核酸模板),或者采用市场常见“离心柱法”和“磁珠法”提取核酸作为模板亦可;2取上述模板2μL加入到复融后的反应液中,通过上述各种加热手段,保证加热温度在37°~42°之间10分钟即可。3上述反应时间结束后,向反应液中加入少许无菌水稀释,后直接插入试纸条,则马上可通过试纸条上的条带颜色变化,从而判定阴阳性。
多酶恒温快速扩增技术在大动物分子诊断领域的应用
————MIRA助力猪疫病的检测
2018年10月开始的非洲猪疫情,很大的冲击了中国生猪养殖市场和屠宰市场。造成了市场格局的大幅变化,也提升了***和民众对畜牧养殖的认识和重视,从简单的关注食品安全开始向关注食材原料安全转移。随着疫情的逐渐缓和,疫情的检测主体已经从生猪检测向环境监控转化。例如,厂区周边取样、运送生猪的车辆取样、进出人员的衣物取样等。这些预防性检测已占据养殖场日常检测量的80%以上,因此对养殖过程中诊断提出了更高的要求,需要便携、快捷、易操作、便于临场检测的新技术,而传统PCR检测技术存在检测时间长、人员技术要求高和设备昂贵等特点,在实际应用上,越来越不适合畜牧养殖等非***区域的检测需求。而我司的MIRA技术恰恰可以弥补上述缺陷。MIRA多酶恒温快速扩增技术,模仿细胞内核酸过程,在体外、常温、恒温的状态下实现核酸的指数式扩增。其核心就是利用多酶系统替代以往利用精密温控设备(PCR仪)才能完成的变性、退火、延伸等流程。