




武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。故若预期杂交结果为阴性时,就必须设阳性对照,当阳性对照亦不显色,就证明杂交过程的某一步骤或所用试剂问题。
在一张保鲜膜上制作一个装有0.5mol/L NaOH的小洼(0.75ml),使菌落面朝上,将滤膜放到小洼上,展平保鲜膜,使滤膜均匀湿润,让滤膜留于原处2-3分钟。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
切片及细胞标本的制备
载玻片的处理 因为原位杂交一般在载玻片上进行,所以载玻片必须保持清洁且不能有任何核酸酶的污染。③FISH通过多次化学反应,使杂交信号增强,灵敏度提高,其灵敏度与性探针相当。一般载玻片可先经洗衣粉浸泡过夜,用流水冲洗、酸中浸泡4~8h,再用流水冲洗,双蒸水洗2~3次。在160℃烤箱中烘烤2~4h。亦可经15磅高压灭菌20min处理,可将载玻片上的核酸酶消除。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。②FISH的实验周期短,探针稳定性高,特异性好,定位准确,能迅速得到结果。
阴性对照用已知不存在相应靶序列的组织标本杂交,结果应为阴性。阴性对照可排除在杂交过程中由于非特异性杂交反应等因素造成的假阳性结果。
阳性对照用已知含靶序列的组织切片与待检标本同样处理,结果应为阳性,称阳性对照。通过阳性对照可证明杂交过程中各个步骤以及所使用的试剂都合乎标准,实验方法可靠。尤其当待检标本为阴性时,阳性对照片呈阳性反应可排除待检标本假阴性的可能。故若预期杂交结果为阴性时,就必须设阳性对照,当阳性对照亦不显色,就证明杂交过程的某一步骤或所用试剂问题。原位杂交是指用特定探针定位、检测DNA、RNA的一种有效的实验方法,通过把特点序列到特殊载体上,通过转录酶反转一条天然的RNA探针,将探针和切片样品进行杂交,通过一系列显色方法,来确定RNA或者DNA表达区域。