微生物限度-微生物限度检查-世纪久海(诚信商家)

1.平皿法

平皿法包括倾注法和涂布法。除另有规定外，取规定量供试品，按方法适用性试验确认的方法进行供试液制备和菌数测定，每稀释级每种培养基至少制备2个平板。

培养和计数 除另有规定外，胰酪大豆胨琼脂培养基平板在30～35℃培养3～5天，沙氏葡萄糖琼脂培养基平板在20～25℃培养5～7天，观察菌落生长情况，点计平板上生长的所有菌落数，计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。点计菌落数后，计算各稀释级供试液的平均菌落数，按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平板的菌落数平均值不小于15，则两个平板的菌落数不能相差1倍或以上。

菌数报告规则 需氧菌总数测定宜选取平均菌落数小于300cfu的稀释级、霉菌和酵母菌总数测定宜选取平均菌落数小于100cfu的稀释级，作为菌数报告的依据。取***高的平均菌落数，计算1g、1ml或10c㎡供试品中所含的微生物数，取两位有效数字报告。

如各稀释级的平板均无菌落生长，微生物限度方法验证，或仅***低稀释级的平板有菌落生长，但平均菌落数小于1 时，以lt;1 乘以***低稀释倍数的值报告菌数。

微生物保存

基本原理是在挑选优良纯培养物并使其处于休眠状态基础上，人为地创造一个有利于休眠的环境，使其长期保存后仍能保持zhong原有的优良特性。基本措施是低温、真空、干燥。

保藏方法：

1、定期移植法

亦称传代培养保藏法，指将junzhong接种于适宜的斜面培养基上，微生物限度，适条件下培养，完成培养于4～6℃进行保存并间隔一定时间(3-6个月)进行移植培养的一种短期种保藏方法。

2、液体石蜡法

指将junzhong接种在适宜的斜面培养基上，适条件下培养好后注入灭的液体石蜡，使其覆盖整个斜面，微生物限度检查，再直立放置于低温(4～6℃)干燥处进行保存的一种保藏方法。

3、真空冷冻干燥法

指将保藏的junzhong细胞或孢子悬浮于保护剂中，经预冻后在真空条件下使水分升华，再经真空封存后保存的一种长期保存方法。

4、-80℃低温法

将junzhong悬浮于保护剂中，在－80℃冰箱中保存的一种长期保藏方法

3.MPN 法

取规定量供试品，按方法适用性试验确认的方法进行供试液制备和供试品接种，微生物限度检测，所有试验管在30～35℃培养3～5天，如果需要确认是否有微生物生长，按方法适用性试验确定的方法进行。记录每一稀释级微生物生长的管数，从表3査每1g 或1ml供试品中需氧菌总数的可能数。

结果判断

需氧菌总数是指胰酪大豆胨琼脂培养基上生长的总菌落数（包括***菌落数）；霉菌和酵母菌总数是指沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的总菌落数（包括***菌落数）。若因沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的***使霉菌和酵母菌的计数结果不符合微生物限度要求，可使用含kang生素（如氯霉su、庆大霉su）的沙氏葡萄糖琼脂培养基或其他选择性培养基（如玫瑰红钠琼脂培养基）进行霉菌和酵母菌总数测定。使用选择性培养基时，应进行培养基适用性检查。若采用MPN法，测定结果为需氧菌总数。