




若您养的是贴壁细胞,请先将细胞消化下来;若是悬浮细胞,请直接按以下步骤进行:1. 以200-300g离心3分钟,收集细胞。2. 用BI冻存液将细胞重悬(不需回温),将细胞密度调整为3~5x106 cells/ml,添加到冻存管中(一般每管1ml)。3. 建议将含有细胞悬液的冻存管放进渐进降温盒或是保温杯中,置于-80°C冰箱6小时以上或是过夜(或不需要程序降温)。4. 将冻存管迅速移到液态氮中保存。5. 冻存24小时后,建议检测细胞存活率。

如何避免细胞抱团?1,用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞。2,对于贴壁非常牢固的细胞(如MDCK),为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,建议分多批多次消化,这样才能大限度地将胰酶对细胞的损伤降到低,保证细胞的状态能够优。3,消化过程中不要使劲摇动培养瓶,这样细胞特别容易成屑样脱落。细胞一旦脱落入悬液里就很难再将他吹打成单个(因为细胞没有受力点了,所以细胞很难分散开)。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,严格控制好消化程度。
细胞骨架不仅在维持细胞形态、承受外力、保持细胞内部结构有序性方面起重要作用,而且还参与许多重要的生命活动,如:在细胞分裂中细胞骨架牵引染色体分离;在细胞物质运输中,各类小泡和细胞器可沿着细胞骨架定向运转。细胞骨架在20世纪60年代后期才被发现。主要因为早期电镜制样采用低温(0-4℃)固定,而细胞骨架会在低温下解聚。人们才逐渐认识到细胞骨架的客观存在。
对于多肽***和多肽类药则需要保存在干燥器中。在将它们暴露于空气之前, 冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,好的方法是以小的工作样量存放。对于含Cys, Met或者TrP的多肽***,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽***易被空气氧化,在封瓶前,慢慢流过多肽***的氮气也会降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽***也容易降解,所有这些肽与不含这些有问题解苷的那些肽相比,生命期有限。