色谱分析法、层析法，是一种分离和分析方法，现代生物企业生产过程中的核心技术之一。在分析化学、有机化学、生***学等领域有着非常广泛的应用。色谱又称色层法或层析法，是一种物理化学分析方法，它利用不同溶质（样品）与固定相和流动相之间的作用力（分配、吸附、离子交换等）的差别，当两相做相对移动时，各溶质在两相间进行多次平衡，使各溶质达到相互分离。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配，以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，终达到分离的效果。色谱理论：保留时间保留时间是样品从进入色谱柱到流出色谱柱所需要的时间，不同的物质在不同的色谱柱上以不同的流动相洗脱会有不同的保留时间，因此保留时间是色谱分析法比较重要的参数之一。保留时间由物质在色谱中的分配系数决定：tR = t0(1 KVs / Vm)式中tR表示某物质的保留时间，t0是色谱系统的死时间，即流动相进入色谱柱到流出色谱柱的时间，这个时间由色谱柱的孔隙、流动相的流速等因素决定。K为分配系数，VsVm表示固定相和流动相的体积。这个公式又叫做色谱过程方程，是色谱学基本的公式之一。
液相色谱仪在使用过程中难免会接触到腐蚀性的物质。这些腐蚀性物质不论是气体、液体还是固体，都有可能损坏仪器的材料和零部件，降低色谱仪的使用寿命。在使用时要尽量避免这种情况的出现。 液相色谱仪流动相类型有多种，流动相性质对样品的分离影响很大。
液相色谱仪流动相类型： 1、按组成可分：单组分流动相和多组分流动相。 2、按极性可分：极性流动相、弱极性流动相和非极性流动相。色谱理论：保留时间保留时间是样品从进入色谱柱到流出色谱柱所需要的时间，不同的物质在不同的色谱柱上以不同的流动相洗脱会有不同的保留时间，因此保留时间是色谱分析法比较重要的参数之一。 3、按作用可分：底剂和洗脱剂。 4、按使用方式可分：等度流动相和梯度流动相。 5、按用途可分：己烷、乙1酸乙1酯、乙醇、乙1腈和水等。 采用二元或多元组合溶剂作为流动相，可以灵活调节流动相的极性和增加选择性，改进分离和调整出峰时间。
液相色谱仪的***维护与气相色谱仪没有多大区别，液相色谱仪的几个维护***的部件，液相色谱仪的主要部件有色谱柱、进样器、检测器、泵，下面我们分别来说明这几大部件的***维护方面。
色谱柱大家都不陌生，是我们做分析的必需品，无论是液相色谱仪还是气相色谱仪都离不开色谱柱。色谱柱是化合物分离的关键，我们在安装时要保证阀件管路的清洁，并且不能碰撞、弯曲或强烈震荡色谱柱，在长期不使用色谱柱的时候要用保存封闭，分析结束后要用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱，流动相在使用前必须进行脱气处理，尽量不使用或少使用高粘度的流动相，在满足灵敏度的前提下，尽可能的使用小进样量。采用的粒径通常为：25～40μm，40～63μm或63～200μm的球形固定相。如果样品比较脏，要进行净化或提纯处理。进样器是液相色谱仪的主要部分之一，我们也要定期进行维护工作。液相色谱仪的检测器在每次分析完成要立即关闭。 泵是液相色谱仪的心脏，我们要定期维护***，这样才能使得其处于状态，能报保证基线平稳，保留时间重现性好，梯度洗脱时压力变化缓慢而且平稳。
