




怎么知道您的细胞正遭受支原体摧残呢,常见的检测方法几种:1.分离培养法,将疑样本接种到支原体培养基中,观察菌落生成。缺点:培养时间长,须3~5周才能判断。2.DNA荧光染色法,利用荧光染剂 (Bisbenzimide, Hoechst 33258) 检测支原体污染,但若有些细胞易有荧光背景,可能会干扰结果判读。3.PCR法,利用特异性引物,经PCR反应检测支原体DNA,灵敏且快速。BI EZ-PCR支原体检测***盒:采用PCR法,简化了细胞培养中支原体污染的检测过程,可检测出细胞培养实验中常见的支原体污染。
细胞为何总是喜欢抱团?1,细胞死释放出DNA,缠绕其他细胞,形成黏性的细胞团(消化的过程可能过于粗暴,吹打太用力,消化太久,消化液太强或***性等)。2,细胞离心速度过大或时间太长。3,消化不完全的时候,细胞和细胞之间的连接没有分开;消化过度的时候,圆形的细胞容易聚堆,再分开很困难!4,状态不好、老化的细胞,也可能会出现抱团生长的情况(比如换液不及时、长的太满才传代、污染等造成的细胞状态)。5,传代后细胞铺板不均匀。
细胞培养时可能导致***的原因:1.细胞传代次数比较多,一定要控制细胞传代次数!大量扩增细胞,将细胞进行冻存,在必要的时候重新复苏。2.胰酶消化时间太长,胰酶消化时间过长容易导致细胞状态不佳以及胞质疏松;细胞传代时需要留意胰酶消化的时间。消化过度,在消化细胞时会对细胞的表面蛋白有较强的损伤,所以消化的时间不能过长,建议使用合适浓度和pH值的消化酶,否则会导致细胞***和分化。