




将细胞冻存管由液态氮中取出,置于室温回温,不用水浴溶解。此时可准备新鲜培养 基、无菌15ml离心管、培养瓶。在生物安全柜内,直接以少量培养基反复冲融,使细胞团块化冻。 先在无菌15ml离心管中加入5ml培养基,再将化冻的细胞悬液加入离心管中。以200~300g,3分钟离心收集细胞。 倒去上清液,重悬细胞,移到培养瓶中培养。
当需要进行细胞共培养、细胞趋化、细胞迁移以及细胞侵袭等研究的时候,需要在培养板上放入小室。小室内通称上室,培养板内则称下室,小室的底部有通透性的膜,一般常用聚碳酸酯膜(PC);根据实验需求选择不同孔径的聚碳酸酯膜, 并且经过不同处理,就可以进行上述的实验。因为聚碳酸酯膜具有通透性,下层培养液中的诱导性成分或是趋化因子,可以影响到上室内的细胞功能,不同厂家对小室的命名也不同,如Transwell、Boyden chamber、Millicell或是Thincert。
细胞***的检测,检测端粒功能,分析检测细胞端粒序列的长度和端粒逆转录酶(telomerase reverse transcriptase, TERT)的活性来评估端粒的功能(高表达的端粒逆转录酶,使得端粒的长度不会随DNA复而缩短,让细胞获得持续分裂的能力);但此检测方法很难成为常规标准分辨细胞***,主要原因是因为无法建立一致性的标准,在不同物种之间细胞发生***时,其端粒长度不具有可比性; 即使来源于同一物种(如人细胞)。
结构种类:纤维蛋白(fibrous protein):一类主要的不溶于水的蛋白质,通常都含有呈现相同二级结构的多肽链许多纤维蛋白结合紧密,并为单个细胞或整个生物体提供机械强度,起着保护或结构上的作用。球蛋白(globular protein):紧凑的,近似球形的,含有折叠紧密的多肽链的一类蛋白质,许多都溶于水。典形的球蛋白含有能特异的识别其它化合物的凹陷或裂隙部位。