经过改造带有HIS3报道***的酵母细胞，只有当HIS3被启动表达才能在缺乏组氨酸的选择性培养基上生长。HIS3报道***的转录表达是由“诱饵”和“猎物”的相互作用所启动的。大多数双杂交系统往往同时使用两个甚至三个报道***，其中之一是 LacZ。这些改造后的***在启动子区有相同的转录因子结合位点，因此可以被相同的转录因子（如上述的Gal4蛋白）。 
原位杂交的优点
1. 能在成分复杂的***中进行单一细胞的研究而不受同一***中其它成分的影响，因此对于那些细胞数量少切散在与其他***中的细胞内DNA或RNA研究更为方便。
2. 由于原位杂交不需要从***中提取核酸，植物原位杂交服务厂家，对于***中含量较低的靶序列有极高的敏***，并可完整地保持***与细胞的形态，更能准确地反映出***细胞的相互关系及功能状态。
原位杂交在前。
（1）常规脱蜡入水。
（2）37℃蛋白酶K消化20min，37℃漂洗液充分洗去蛋白酶K。
（3）滴加探针，加盖玻片，避光、湿盒、37℃过夜孵育。
（4）如果***盒允许的话，将***盒中洗脱液水浴加温至37℃震荡洗脱多余的探针。
（5）加碱性磷酸酶标记的抗1体，37℃孵育半小时，洗去抗1体后显色。
免1疫组化在后。
（1）将显色后确认为阳性的切片充分漂洗。
（2）在PH为6.0的枸橼酸钠溶液中，微波至96℃左右，作用10min。
（3）滴加一抗，37℃湿盒孵育2h。
（4）充分漂洗切片，滴加二抗，室温下孵育40-50min。
（5）DAB显色后，采用PBS中止显色反应。
（6）不要复染核，不然就盖住原位杂交信号了。
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