




武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;利用农介导植物瞬时表达侵染本氏和洋葱表皮细胞,观察GFP荧光表达情况。可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
分别用70%乙醇和灭菌蒸馏水清洗金粉(直径为1 μm),加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液,取100 μL 放在含有1.0 cm2 洋葱表皮的玻璃皿中,边振荡边加入10 μL pCambia2301-GaMYB2-GFP质粒,逐步加入40 μL 0.1 mol·L-1 亚精胺和100 μL2.5 mol·L-1 C***2,振荡混匀。***枪GDS-80轰击时氦气罐的气压为1 300 psi,取10 μL DNA 包裹好的微粒悬浮液加到***枪***,进行轰击,之后放置25℃避光过夜培养,使用ConfocalLaser激光共聚焦显微镜观察。采用反向遗传学技术验证PnCHI1的功能,通过根***农介导将PnCHI1转入中过量表达。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;方法:用脂质转染胺(Lipofec-tAMINE2000)为载体分别以Cθ-EGFP和pEGFP-N1转染HeLa细胞,流式细胞仪分析其表达率,激。可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
目的构建通用型植物GFP标签蛋白表达载体,研究蛋白质的细胞内***对蛋白质组学和代谢组学等研究的意义。方法构建2种GFP标签蛋白质表达载体,分别在GFP的N和C端预留位点,以目的***。利用该***载体,分别内切酶Fok I的切割结构域与MS2噬菌体外壳蛋白MCP的串联蛋白(Fok I:MCP:Fok I,FMF)至GFP的N和C端,得到FMF与GFP的融合蛋白GFP:FMF和FMF:GFP,其中FMF的N端带有细胞核***信号。利用农介导植物瞬时表达侵染本氏和洋葱表皮细胞,观察GFP荧光表达情况。结果成功构建了2种融合了目的***和GFP的表达载体p ER35GFP-FMF和p ER35FMF-GFP。GaMYB2在洋葱表皮细胞中的瞬时表达分析:采用***枪轰击的方法,用包裹质粒的金粉对洋葱表皮进行轰击,暗培养过夜后,在激光共聚焦显微镜下进行观察,从图A中可以看出对照GFP空载体在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光,为组成型表达。激光共聚焦结果显示侵染了只含GFP载体的农的细胞,可在细胞核和细胞质中检测到GFP的绿色荧光,而侵染了含核***信号FMF:GFP和GFP:FMF 2种融合蛋白载体的农的细胞,只在细胞核中观察到绿色荧光。结论该载体系统可运用于研究蛋白质在植物细胞中的亚细胞***,具有简单、和通用性的特点。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;对NJH12表达芯片进行分析,筛选出大量与受体植株有显著差异表达的***。可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
