




安普未来生物 MIRA 助力新冠疫情一线!
新型冠状病毒现在准确的确诊方法是核酸检测,但传统的荧光定量PCR方法需要采取病毒提取、反转录、荧光定量扩增等多步操作,完成整个检测实验长达3小时以上。并且该病毒有可能通过气溶胶传播,实验中病毒的核酸提取过程需要多步骤处理标本,操作复杂,检测人员被染的风险几率高。为了很快控制住疫情,我们迫切需要一种更安全、简便、快速的检测方法,这就是安普未来的新型冠状病毒恒温快速检测方法。
潍坊安普未来生物科技有限公司创业团队,历经十年自主研发出多酶恒温快速扩增(即Multienzyme Isothermal Rapid Amplification ,以下简称MIRA)技术,这是一种恒温核酸快速扩增技术,依靠多种功能蛋白在常温下完成核酸的快速扩增,可替代目前的聚合酶链反应 (PCR)技术。
除了前述的胶体金跨速核酸检测法以外,公司还具备荧光型检测方法。结合本公司所独创的超快速核酸提取***(5分钟提取DNA/RNA用于扩增)和荧光检测仪,可将整个核酸检测实验的全部时间缩短至8至20分钟内完成。
安普未来的解决方案操作十分简单
1核酸提取
直接取咽拭子等样品放入管A中(含裂解液,可灭活病毒);
管A放入95℃-100℃水浴或者金属浴10分钟;2扩增反应
向含有冻干***(冻干***包含了生物酶与各反应组分;可常温运输,便捷)的反应管中加入42.5 μL R buffer使其复溶;
取核酸提取步骤中提取完成的样本3-5μL 加入反应管;
然后在反应管加入2.5μL启动B buffer,盖上盖充分混匀后上机反应。反应温度为42℃,时长20min,实时显示荧光扩增曲线。其结果分析与荧光定量PCR类似,简单易懂。
多酶恒温快速扩增技术具有以下特点
1、检测精度更高,本技术检测目标为核酸,灵敏度可以达到10个拷贝的数量级;2、“小、快、非***操作”,本技术对应的仪器其小而便捷,对操作技能要求不高,检测时间短(5-15分钟可判定检测样本的阴阳性),可广泛用于野外、兽医站、养殖基地等场景。3、果判读的方式也多种多样:凝胶电泳型、荧光定量型和胶体金试纸条型。本技术能够实现在动物疫病检测领域中即时检测的要求,满足了养殖业转型升级对现代兽医服务的迫切需求,为动物疫病防控工作以及现代养殖业的可持续发展保驾护航。
同时,安普未来也提供可自主开发的科研类***,通过指导使用者自行设计引物与探针,从而令广大用户均可实现自主开发分子快速检测***,实现20分钟内完成核酸扩增、判读结果。
恒温快速扩增***盒操作步骤
提前30分钟将***盒所需组分取出,室温融化,震荡混匀。
1) 每个干粉反应管加入29.4 μL A buffer(注意:A buffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产生影响);
2) 每个反应管分别加入2 μL上游引物、2 μL下游引物和0.6 μL探针(引物和探针浓度为10 μM,对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中);
3) 向反应管中依次加入11.5 μL ddH2O和2 μL核酸模板(可根据核酸浓度调整加入的核酸模板体积,并相应调整加入的ddH2O体积,至模板与ddH2O总体积为13.5 μL);
4) 然后向反应管中加入2.5 μL B buffer并充分混合(对于多个反应,建议将B buffer加至反应管的盖子内侧,上下颠倒反应管8-10次混匀);
5) 混匀后,将反应液甩(或快速离心)至管子底部,然后立即将反应管放入恒温设备中37-39 oC孵育8-12 mins;
6) 反应结束后,取10 μL加入含有190 μL ddH2O的离心管中,混合均匀后,将胶体金试纸条的样品端插入离心管中平衡,5 mins内观察质控线与检测线判读结果。