液相色谱柱多少钱-广州联方(在线咨询)-云浮液相色谱柱

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液相色谱柱的使用方法

关于色谱柱的安装、维护、保存以及由色谱柱导致的这样那样的色谱故障也是一门学问。gao效液相色谱柱的正确使用包含：加装保护柱，过滤流动相和样品，净化样品，避免过高的柱压，注意温度和酸碱度，正确及时的冲洗等。

1.加装保护柱

保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有1、2amp;mu;m等不同孔径的滤器，但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污染，因此，加装保护柱是必要的，特别是在分析中药、zhong成药等复杂混合物和生物样品时更是保护分析柱必不可少的措施。

保护柱填料应与分析柱一致，粒径可较分析柱大。保护柱属消耗品，经过一定次数的样品分析(50～100次)后，出现柱压显著升高或峰形变坏或基线漂移时，应考虑更换保护柱。

2.过滤流动相和样品

流动相通常由水或缓冲溶液与有ji溶剂混合而成，原则上，所有经过色谱柱的流动相均应过滤，但在实际操作上应视具体情况而有所区别:当有ji溶剂用色谱纯级，水用石英亚沸水或其它超纯水时，在能确保水和有ji溶剂的质量且没有受到污染时，过滤并无更多实际意义。

当流动相中含有缓冲盐时，则过滤是必要的，如前所述，当缓冲溶液放置一段时间(视环境温度不同而异，夏季一般不超过48 h，冬季一般不超过一周)后，在使用前还应重新过滤。

所配制的样品试液在注入流路系统前均要经0. 45amp;mu;m ( 0. 22amp;mu;m则更好)孔径滤膜过滤。要注意区分水系和油系，二者不可混用，以防止滤膜溶解而造成污染。

装流动相的容器和色谱系统中的在线滤器要定期清洗和更换，以避免滤器因过载而起不到过滤作用。

3.净化样品

当样品中含有对色谱柱有损害的化学成分，如产生yong久性吸附的蛋白质、糖等有机分子和强吸附性物质，以及可能对柱填料产生***作用的基团离子。在进样前应尽可能对样品进行分离提纯以除去多余杂质组分。

4.避免过高柱压

虽然gao效液相色谱柱能耐受的压力可达6000 p si (磅/平方英寸) ，但过高及过大的压力变化均会缩短色谱柱的寿命，避免的方法是

(1)柱压过高时，尽可能采用较小的流速，以不超过柱z大允许压力的一半为宜。

( 2)当流速较大时，应采取流速梯度的办法使流速分步到位。

(3)使用手动进样阀时，进样阀的切换要尽可能的快。否则超过20%的压力冲击会很快使柱报废。当使用多柱联用时，柱切换要避免在高压下进行。

5.注意温度和酸碱度

一般以硅胶为基质的色谱柱z高使用温度不超过60℃，以低于40℃为宜，特别是在流动相pH接近使用限度时，更应降低使用温度。

温度过高会加快键合相的水解和硅胶的溶解，从而使填料性质改变，柱床塌陷，降低柱效，改变峰形。

正确及时的冲洗

开始试验前，应了解柱中当前是何种溶剂。对于新色谱柱，如无特殊说明均为评价报告中所用流动相。柱中当前溶剂一定要与分析样品所用流动相互溶，如不能混溶，要用与二者均能相互混溶的第三种溶剂过渡。

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次 UHPLC 分析中获得尽可能多的信息。

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提高液相色谱柱柱效的方法

（1）降低移动相的流速，但会使分析时间延长。

（2）减少固定相的量，但色谱柱中样品的负载量也随之减小。

（3）减小固定相的颗粒度，但不能过分，过分后色谱柱的渗透率也会减小。

（4）选用低粘度的移动相，以利于快速传质，但却不利于多组份分析。

（5）适当提高柱温，可降低移动相的粘度，但柱效和分离度也随之降低。

（6）尽量减小停滞移动相的体积，但却加快了移动相的流速。

对柱效值进行跟踪测算应注意的问题

我们也应记住柱效值并不足以预测在所有条件下的柱性能，对大多数色谱工作者来说，柱性能指的是色谱柱用于特定分离的能力，而仅仅有高柱效并不能保证这种分离能力。

不管用什么特定的测试方法，都会有几个参数影响柱效的测定。这些参数包括:洗脱液的成分和粘度及其线流速，测定塔板数所用的溶质，温度，柱长，填料装填方式，颗粒度，还有所选用的测量和计算方法。而测量和计算方法对柱效值的确定起着极大的作用。

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液相色谱柱基本构造

柱管、压帽/卡套、筛板(滤片)、接头 分析型

常规分析柱

窄径柱(1.0mm、2.1mm)

毛细管柱(0.2-0.5mm)

制备型

半制备柱(〉

制备柱(21.2mm、30mm、50mm)

保护柱

保护柱套

保护柱芯

液相色谱柱填料基质

1. 硅胶基质- pH 2-8 ------------------ 高或低pH下， 硅胶会溶解

2. Al2O3 . nH2O - pH1-14-----------化学修饰困难

3. 聚合物基质 - pH1-14-------------孔结构复杂， 孔径不均匀导致柱效不够高， 有ji溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损

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