




突破传统桎梏,将分子检测带入一个新领域
如何将传统分子检测方法变的更加简单易懂、操作方便和快速精准。一直是分子检测行业的一大课题。各个厂家和科研院所都在这方面投入了大量的时间和金钱。
安普未来有幸在该领域完成了突破和革新。在荧光检测领域,自主研发的MIRA技术将60分钟以上的核酸扩增阶段,缩短到20分钟。其开发了“核酸胶体金试纸条检测法”,可彻底抛弃掉高昂的检测设备,仅需配备简单的温控仪器即可(如金属浴、水浴锅等),甚至42°温水和利用***温度亦可完成扩增反应,且核酸扩增时间进一步缩短到10分钟不到。其结果的准确率与传统PCR检测方式准确率一致。
什么样的分子检测技术才是高性价比的,且又能怎样帮到畜牧养殖企业呢?
“首先”分子检测的很大优势是可以将动物病害的预防大幅度提前。现在较为普及的检测法,是在牲口已有较为明显的发病征兆时,利用其本身产生的蛋白才能检测出来。所以属于中晚期预防技术。而,分子扩增技术是将潜伏在牲口体内或周边的微量病毒,在体外进行繁殖扩增,进而直接检测病毒本身。因此属于早中期检测技术。
恒温快速扩增***盒操作步骤
提前30分钟将***盒所需组分取出,室温融化,震荡混匀。
1) 每个干粉反应管加入29.4 μL A buffer(注意:A buffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产生影响);
2) 每个反应管分别加入2 μL上游引物、2 μL下游引物和0.6 μL探针(引物和探针浓度为10 μM,对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中);
3) 向反应管中依次加入11.5 μL ddH2O和2 μL核酸模板(可根据核酸浓度调整加入的核酸模板体积,并相应调整加入的ddH2O体积,至模板与ddH2O总体积为13.5 μL);
4) 然后向反应管中加入2.5 μL B buffer并充分混合(对于多个反应,建议将B buffer加至反应管的盖子内侧,上下颠倒反应管8-10次混匀);
5) 混匀后,将反应液甩(或快速离心)至管子底部,然后立即将反应管放入恒温设备中37-39 oC孵育8-12 mins;
6) 反应结束后,取10 μL加入含有190 μL ddH2O的离心管中,混合均匀后,将胶体金试纸条的样品端插入离心管中平衡,5 mins内观察质控线与检测线判读结果。
恒温快速扩增***盒注意事项:
1. 由于***盒灵敏度非常高,在进行反应时请注意避免微量核酸污染,并尽量考虑设置空白对照以确认是否有核酸污染。
2. ***盒保质期12个月。每次使用时,请取出实验所需的MIRA反应单元的数量,置于冰浴条件下并在8小时内使用;剩余部分,请置于存储条件下。
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