突破传统桎梏，将分子检测带入一个新领域
具体操作方法如下：
1. 采用我司自主开发的快速核酸释放剂提取核酸（核酸释放剂与样本混匀，室温静置5分钟即可取上清作为核酸模板），或者采用市场常见“离心柱法”和“磁珠法”提取核酸作为模板亦可；
2. 取上述模板2μL加入到复融后的反应液中，通过上述各种加热手段，保证加热温度在37°~42°之间10分钟即可。
3. 上述反应时间结束后，向反应液中加入少许无菌水稀释，后直接插入试纸条，则马上可通过试纸条上的条带颜色变化，从而判定阴阳性。
? 自主研发用时，引物设计注意事项：
核酸试纸条三明治夹心检验法探针设计：在上下游引物中间设计一条长度为46-52nt与目的片段互补序列；5’端修饰一个抗原标记（典型FAM）;5’端和3’端中间位置标记一个dSpacer(THF)；3’端标记一个修饰基团，如胺基、生物素或C3-Spacer，同时要求下游引物5’端标记一个修饰基团。
什么样的分子检测技术才是高性价比的，且又能怎样帮到畜牧养殖企业呢？
“首先”分子检测的很大优势是可以将动物病害的预防大幅度提前。现在较为普及的检测法，是在牲口已有较为明显的发病征兆时，利用其本身产生的蛋白才能检测出来。所以属于中晚期预防技术。而，分子扩增技术是将潜伏在牲口体内或周边的微量病毒，在体外进行繁殖扩增，进而直接检测病毒本身。因此属于早中期检测技术。
多酶恒温快速扩增技术在大动物分子诊断领域的应用
————MIRA助力猪疫病的检测
2018年10月开始的非洲猪疫情，很大的冲击了中国生猪养殖市场和屠宰市场。造成了市场格局的大幅变化，也提升了***和民众对畜牧养殖的认识和重视，从简单的关注食品安全开始向关注食材原料安全转移。随着疫情的逐渐缓和，疫情的检测主体已经从生猪检测向环境监控转化。例如，厂区周边取样、运送生猪的车辆取样、进出人员的衣物取样等。这些预防性检测已占据养殖场日常检测量的80%以上，因此对养殖过程中诊断提出了更高的要求，需要便携、快捷、易操作、便于临场检测的新技术，而传统PCR检测技术存在检测时间长、人员技术要求高和设备昂贵等特点，在实际应用上，越来越不适合畜牧养殖等非***区域的检测需求。而我司的MIRA技术恰恰可以弥补上述缺陷。MIRA多酶恒温快速扩增技术，模仿细胞内核酸过程，在体外、常温、恒温的状态下实现核酸的指数式扩增。其核心就是利用多酶系统替代以往利用精密温控设备（PCR仪）才能完成的变性、退火、延伸等流程。
恒温快速扩增***盒操作步骤
提前30分钟将***盒所需组分取出，室温融化，震荡混匀。
1) 每个干粉反应管加入29.4 μL A buffer（注意：A buffer需完全融化混匀，否则会对实验效果产生影响）；
2) 每个反应管分别加入2 μL上游引物、2 μL下游引物和0.6 μL探针（引物和探针浓度为10 μM，对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中）；
3) 向反应管中依次加入11.5 μL ddH2O和2 μL核酸模板（可根据核酸浓度调整加入的核酸模板体积，并相应调整加入的ddH2O体积，至模板与ddH2O总体积为13.5 μL）；
4) 然后向反应管中加入2.5 μL B buffer并充分混合（对于多个反应，建议将B buffer加至反应管的盖子内侧，上下颠倒反应管8-10次混匀）；
5) 混匀后，将反应液甩（或快速离心）至管子底部，然后立即将反应管放入恒温设备中37-39 oC孵育8-12 mins；
6) 反应结束后，取10 μL加入含有190 μL ddH2O的离心管中，混合均匀后，将胶体金试纸条的样品端插入离心管中平衡，5 mins内观察质控线与检测线判读结果。
