厂家(图)、华南区伯乐PCR***维修中心、PCR

美国BIO-RAD PCR仪***维修服务中心，伯乐PCR仪华南维修中心，提供广州地区快速***维修服务。Bio-Rad公司始创于上世纪60年代，总部设在美国加州， ，经过40年的不断开拓与发展，公司持续保持健康的年销售增长率和利润率，现在已发展为世界临床诊断和生命科学领域屈指可数的高科技跨国公司之一。Bio-Rad公司的产品主要分布在生命科学和临床诊断两大领域。

PCR的应用领域：

1、遗传病和某些疑难病的诊断

2、病原体的检测。某些******一般用微生物学、生化和*** 学技术无法查出病原体时，可用PCR来检查。

3、法医和刑侦鉴定。

4、ai***的检查。

5、***探针的制备。

6、***组测序、染色体巡视。

7、cDNA库的构建。

8、***突变的分析和***诱变。

9、DNA重组。

10、***的分享和***。

标准的PCR过程分为三步：

DNA变性

（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA

退火

（60℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。

延伸

（70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右，活性***r佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端开始以从5′→3′端的方向延伸，合成与模板互补的DNA链。

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多通道指可同时检测一个样品中的多种荧光，仪器就可以同时检测单管内多模版或者内标 样品，通道越多，仪器适用范围越宽、性能就更强大。荧光检测系统主要包括激发光源和检测器。激发光源有卤钨灯光源、发光二极管LED光源，前者可配多色滤光镜实现不同激发波长，PCR，而单色发光二极管LED价格低、能耗少、寿命长，不过因为是单色，需要不同的LED才能更好地实现不同激发波长。监测系统有超低温CCD成像系统和PMT光电倍增管，华南BIO-RAD PCR***，前者可以一次对多点成像，后者灵敏度高但一次只能扫描一个样品，需要通过逐个扫描实现多样品检测，对于大量样品来说需要较长的时间。

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反应的控制

①PCR反应的缓冲液 提供合适的酸碱度与某些离子

②镁离子浓度 总量应比dNTPs的浓度高，华南区伯乐PCR***维修中心，常用1.5mmol/L

③底物浓度 dNTP以等摩尔浓度配制，20～200umol/L

④TaqDNA聚合酶 2.5U(100ul）

⑤引物 浓度一般为0.1 ～ 0.5umol/L

⑥反应温度和循环次数

变性温度和时间 95℃，30s

退火温度和时间 低于引物Tm值5 ℃左右，一般在45～55℃

延伸温度和时间 72℃，1min/kb(10kb内）

Tm值=4(G C) 2(A T)

循环次数 ：一般为25 ～ 30次。循环数决定PCR扩增的产量。模板初始浓度低，可增加循环数以便达到有效的 扩增量。但循环数并不是可以无限增加的。一般循环数为30个左右，循环数超过30个以后，DNA聚合酶活性逐渐达到饱和，产物的量不再随循环数的增加而增加，出现了所谓的“平台期”。