笃玛 枸橼酸纳抗凝兔血 产品介绍

枸橼酸纳抗凝兔血
小牛***和胎牛***有何区别与注意事项?

来源不同：胎牛***(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的***，新生牛(小牛)***(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。

组份与比例不同：两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、***及其他活性物质等组份与比例不同，用途与用法不同：某些细胞必需胎牛***才能生长，而有些细胞只需小牛***即可，使用浓度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。

***保存和使用须注意：***应保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超过一个月。解冻***时 ，应先将***至于2-8℃冰箱，并经常摇匀使之溶解，然后至室温放置使之升温，***不可将冷冻的***直接放入37℃水浴或者温箱中，如放在37℃解冻，颜色加深，粘稠度也会增加，***在解冻和热灭活后，应按用量分装并于-20℃保存，避免反复冻融。
枸橼酸纳抗凝兔血
***的保存注意事项

（1）需要长期保存的***必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于***结冰时体积会增加约10%,因此,***在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.

（2）热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的***.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使***中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成***沉淀物显著增多,而且还会影响***的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.

（3）瓶装***解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的***放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀（小心勿造成气泡）,使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将***从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.

（4）一般厂商提供的***为无菌,无需再过滤***.如发现***有悬浮物,则可将***加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤***.

（5）***中的沉淀物 絮状物:主要是***中的脂蛋白变性及解冻后***中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响***本身的质量.可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理. 显微镜下"小黑点":经过热处理过的***,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为***受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑***质量,则应立即停止使用,更换另一批号的***.

（6）切勿将***在37℃放置太久,否则***会变得浑浊,同时***中的有效成分会破会而影响***质量.
枸橼酸纳抗凝兔血
操作步骤
试管法（改良 Mayer 法）
1、致敏羊红细胞： 2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素（ 1:2000），混匀，置 37℃水浴 30min。
2、稀释***：待测*** 0.2ml，加应用液 3.8ml，稀释度为 1:20。
3、配制溶血标准管：全溶血管:2%绵羊红细胞 2ml 加 8ml 蒸馏水，混匀。
                   50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加缓冲液 2ml。
4、按表所示，依次加各成分于试管中，混匀，置 37℃水浴 30min， 第 10 管为非溶血对照：补体 CH50 测定试管法
 
5、结果测定：取出试管， 2000r/min 离心 10min，对照管应不溶血。肉眼比色，选与 50%溶血标准管相近二管，再用分光光度计测（波长 542nm、 0.5cm 比色杯） OD 值，
确定与标准管***接近者为终点管，然后按下公式计算 CH50 值：
          ***补体 CH50（ U/ml） =（ 1/***用量）×稀释度。
如第 5 管为终点管，测待测***中CH50为66.7U/ml。***补体CH50正常值为50-100U/ml。