货号: 2001-1K
包装规格: 一家实验室购买一套可***无限次使用 (2~8℃保存)
***盒组成: (1) 9种表达载体 (2) 2种***
(3) 2种穿刺*** ****部分修改***0为JM109,冻干***变为穿刺***!
价格:5680元/KIT
产品简介
原核表达系统近年来研究取得突破性进展
1998年,美国Incyte Pharmaceutical公司华裔科学家Zhang Yang在《Protein expression and purification》(vol12,159-165)上发表***《Expression of Eukaryotic proteins in soluble form in Escherichia coli》,文章采用E.coli分子内伴侣DsbA技术将IGF-I、IGFBP-3、3Cproteinase、TGFb-2、STGFb-RII、BDNF、GDNF、mEGFBP、Leptin和GFP十个***全部实现了可溶性表达,且表达量均大于25%。更为惊奇的是由于DsbA分子伴侣的作用使得拥有9个半胱氨酸的复杂结构的IGFBP-3能在E.coli内形成可溶性具生物活性的高表达重组蛋白。
2002年,美国冷泉港实验室出版的《Protein Science》(2002,11:313-321)上发表了瑞典科学家Torleif《Rapid screening for improved solubility of ***all human proteins produced as fusion proteins in Escherichia coli》一文,从而揭开了原核***快速组合筛选表达系统用于蛋白组学研究的序幕。
产品特色
上海西宝生物科技有限公司通过和留美学者合作,现向国内推出原核******快速表达***盒。它将九种表达载体包括分泌型、引导分泌型、胞内直接表达型、分子内伴侣协助折叠型、高度稳定伴侣型等系统的多***位点统一,同时统一了诱导表达剂和统一了培养基,一次可以同时***九种载体进行表达筛选,极大地节省宝贵的科研时间。其实,像美国Amgen、Gentech、Incyte这类***的生物技术公司也是采用多系统多载体同时筛选快速表达的策略。这一策略的***大优势就是快速且成功率高。本系统非常适合高通量快速筛选大量未知***,对***组学和蛋白组学的研究是一个不可缺少的工具。
1)冻干***可长期稳定保存。
2)提供详实的操作说明和丰富的参考文献。
3)下游多种亲和层析组合方便您快速纯化目的蛋白。
4)分子内伴侣和分泌表达能***大限度避免包涵体形成,直接获得有活性可溶蛋白,这一点对于未知***功能的研究很重要。
5)九套***表达载体同时***筛选极大地节省您宝贵的科研时间。
6)T7溶菌酶和lacIq阻遏蛋白能起到严格控制诱导前表达的作用,同时强启动子、高拷贝***子等方法结合可获得高达50%的表达量。
7)已有200多个***通过该***盒表达成功。
*本***盒包括冻干菌株、***和统一多***位点的九种表达载体。用户只要扩增出一段不带终止密码子或带终止密码子的阅读框编码******进九种表达载体,可同时筛选,节省时间。一般两至三周可以筛选出表达菌株,在此基础上,进一步根据需要进行实验室菌株的优化从而成为工程菌株。
近年来Medline报导了大量利用原核表达获得有活性的可溶蛋白,现举例如下:
Gene Expression method Index Proinsulin DsbA fusion J.Biotechnol 2001 84(2):175-85
htPA DsbA coexpression Appl Environ Microbiol 1998 64(12):4891-6
Bovine enterokinase DsbA fusion Biotech nology(NY),1995,13(9):982-7
Mucin MBP fusion Protein Expr Purif 1999,15(1)146-54
Human angiogenin OmpA signal Biochem Mol Biol Int1999,47(2):267-73
Bacillus lipase OmpA signal Appl Microbiol Biotechnol 1998 Apr;49(14):405-10
HEV antigen Thioredoxin fusion Zhonghua shi yan he lin chuang bing du xue za zhi 2002,16(1):20-2
P55 TNF receptor Thioredoxin fusion Protein Expr purif 2001,23(2)226-32
hLH/CG receptor Thioredoxin fusion Endocrine 2001,14(2):205-12
Pokeweed antiviral protein MBP fusion Protein Expr Purif 1999,15(1)146-54