叶绿素含量测定可能是一个***基本、***简单的测定对于植物生理特别是光合作用的研究中， 任何一个看似简单的操作其实都有着不可小视和忽略的问题，就像叶绿素仪在使用时需要注意的问题也不少, 诸如取材叶片的叶位、叶龄, 分光光度计的分辨率和用于比色的叶绿素提取液浓度等。
叶绿素含量测定http://www.ny-17.com/的简化基本步骤
- 取样: 用知道确切面积的模板或打孔器切取1 cm2左右叶片(注意避开比较粗大的叶脉), 切成长约 5 mm、宽约 1 mm 的细丝。
- (2)浸提: 将叶片细丝投入含5 mL 80%***的刻度试管中, 封管口后于暗中提取至细丝完全变白色为止(过夜即可)。如果中间轻轻摇晃试管几次, 则可以缩短提取时间。
(3)比色:为弥补可能由于溶剂挥发带来的损失,可用 80% ***将上述提取液重新定容至 后将管内溶液轻轻倒入比色杯中, 按照 Arno(1949)方法用光波长分辨率较高的分光光度计(本文用UV-120型分光光度计, 日本Shimadzu公司制造)分别于 663 nm 和 645 nm 处读光密度(OD)。
(4)计算: 首先按Arnon (1949)的公式计算提取液的叶绿素浓度(CV, μg·mL-1)。Chl a=12.7 OD663
-2.69 OD645; Chl b=22.9 OD645-4.86 OD663; CV=Chla+Chl b。然后, 按下式计算以单位叶面积表示的叶绿素含量(mg·dm-2): CA=CV1/1 000×5×100/S=0.5CV/S。这里, CA和 V的下标 A 和 V 分别代表面和体积, S为用于提取叶绿素的叶片面积(c2