SYBR Green I介绍:
SYBR Green I是高灵敏的DNA荧光染,既适用于各种电泳分析,又适用于荧光定量PCR。
SYBR Green I for Real Time PCR, 100x
SYBR Green I for Real Time PCR, 100x荧光染料用于荧光定量PCR试验中
SYBR Green I与dsDNA 结合荧光信号可增强800—1000倍。在PCR反应体系中,加入过量SYBR Green I荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,荧光信号增强,而不掺入链中的SYBR Green I染料分子荧光不变,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。荧光可以在退火阶段或者延伸阶段测定。
SYBR Green I荧光定量PCR的试验成功有很多因素,但是SYBR Green I的使用浓度是非常关键的因素 ,如果SYBR Green I的浓度过低会使荧光信号的变化降低。这就意味着低拷贝的样品可能无法检出;而在高浓度时,将会***PCR反应。降低PCR反应效率。所以一般在使用SYBR Green I时应根据实际情况优化使用浓度,反应的终浓度为1×到0.2×之间。
提高镁离子浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的***作用。我们建议在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时,镁离子浓度要比无SYBR Green I 的普通 PCR 反应要高出 0.5 到3mM。
注:SYBR GREEN I是一种非常敏感的dsDNA检测染料。
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