PAXgene Blood DNA Kit
从全血样本中纯化至多500 μg***组DNA
- 同一体系中进行血液收集和纯化
- 易于操作
- 提高工作流程的效率
PAXgene Blood DNA系统包括用于血液采集和稳定的PAXgene Blood DNA Tubes和用于单管纯化DNA的PAXgene Blood DNA Kit。
性能
PAXgene Blood DNA System分离的DNA A260/A280比值在1.7–1.9。片段大小20–200 kb，平均长度50–150 kb（参见High quality and high molecular weight of genomic DNA）。DNA平均产量为150–500 µg，由血样中的核细胞数目决定。纯化的DNA可用于PCR、定量和real-time PCR（参见Efficient multiplex PCR of 3 mitochondrial genes）。
原理
PAXgene Blood DNA System是整合的标准化体系，用于收集和稳定全血样本并分离***组DNA。该体系通过PAXgene Blood DNA Tubes收集和稳定血液，并使用PAXgene Blood DNA Kit纯化DNA。
PAXgene Blood DNA Tubes包含可防止血液凝结以及可稳定白细胞的混合***，用来收集血液。血液样本可在室温下在管中储存长达14天。用PAXgene Blood DNA Kit中提供的缓冲液获得的高纯度的***组DNA适合各种下游应用。
操作流程
PAXgene Blood DNA操作步骤如流程图PAXgene Blood DNA procedure所示。血液样本（8.5 ml）由PAXgene Blood DNA Tubes收集，并储存或运输。如需纯化DNA，则将血液转入处理管中（已预充细胞裂解缓冲液），将溶液混合，裂解红细胞和白细胞。细胞核和线粒体通过离心收集、洗涤，重悬于裂解缓冲液中。蛋白污染物经蛋白酶孵育后去除。DNA用异丙tong沉淀、70%乙醇洗涤、干燥，并重悬于缓冲液。
应用
纯化的DNA可用于多种下游应用，包括：
PCR和定量real-time PCR
Southern印迹
SNP***分型
******组研究
SNP发现和鉴定
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特点
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参数
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| Applicati*** | PCR, qPCR, real-time PCR, blotting, genotyping |
| Elution volume | 1 ml |
| Format | Processing tube |
| Main sample type | Whole blood |
| Processing | Manual (centrifugation) |
| Sample amount | 8.5 ml |
| Time per run | 60 min/8 samples |
| Yield | 150–500 µg |