MPbio土壤提取***http:///采用独特的缓冲液,尽可能的去除腐殖酸。提取的***组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。
使用本***盒提取的***组DNA可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
MPbio土壤提取***操作步骤:
1,称取土壤样本0.1-0.3g于离心管(强烈建议2ml圆底离心管),加入450ul溶液Ⅰ剧烈震荡混匀1-2min至看不到较大固体块。
2,加入50ul溶液Ⅱ颠倒混匀,65℃水浴5min,每2min混匀一次。
3,加入100ul溶液Ⅲ颠倒混匀,室温12000rpm离心10min。
4,取上清,在上清中加入5ul核酸助沉剂,再加入三倍体积无水乙醇,充分混匀。
4、12000rpm离心5min,弃上清,沉淀加入1ml 70%乙醇,轻轻混匀,再次12000rpm离心5min,弃上清,将离心管在离心机中再次离心30S左右,吸去底部少量液体。
5、 室温放置2min左右,等沉淀边缘微微发白,加入50-100ulTE缓冲液溶解,如很难溶解,可55℃水浴5分钟。
6、电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
因为土质千差万别,得到的DNA含量也是相差很大,如果电泳无法检测,可用PCR检测。
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