酶制剂及其底物
凡***性又能呈现有色化学反应的酶，原则上均可作为标记用。但作为标记抗1体用的酶应满足下列要求：3 D/ Y2 U# ~ S d( r* a" Z X8 g
(1)来源方便，易于纯化；
(2)比活性高，性质稳定；9 zamp; g$ X- l$ D) C9 r# U7 a0 C
(3)酶活性和量能 I w/ ^amp; O9 ]
用简单方法测定。目前在***酶技术中常用的酶为辣根过氧化物酶(HRP)和硷性磷酸酶(AP)，其次还有葡萄糖氧化酶，β-半乳糖苷酶、溶菌酶和苹果酸脱氢酶等。
温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃（冰箱温度）等。37℃是实验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗1体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时，两次抗原抗1体反应一般在37℃经1-2小时，产物的生成可达顶峰。为加速反应，可提高反应的温度，elisa ***盒，有些试验在43℃进行，但不宜采用更高的温度。抗原抗1体反应4℃更为彻底，在放1射***测定中多使反应在冰箱中过夜，以形成多的沉淀。但因所需时间太长，在ELISA中一般不予采用。
3).丙1酮分级分离：将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中，elisa***盒公司，在不断搅拌下，用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至－15℃的丙1酮，放置片刻，在冰冻离心机中以4000r/min离心15min，弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙1酮，(操作同上)，静置后，在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中，透析除去丙1酮。可得RZ值近于1的酶溶液。
4).精制：将上步酶液适当稀释，滴加1mol/L***锌溶液，使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L，5 000r/min离心10min，elisa***盒，得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤，离心，elisa ***盒 价格，洗液与清液合并，分装于透析袋内，用水透析除盐，用微孔滤膜过滤，进行真空冰冻干燥(约得20mg)，产品呈米***纤维状松软物，HRP产品的?RZ?值可达3.0左右，置真空干燥器中低温保存。? 3 y; ~/ O3 z Bamp; A1 d
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