







Gα13活化试验。MEF细胞分别用LPA(第2道)或不加LPA(1道)处理。细胞裂解物用抗活性Gα13单克l隆抗l体(Cat)孵育。#26902)(顶面板)。这个用抗Gα13兔多克l隆抗l体(Cat)免l疫印迹法检测沉淀活性Gα13#21005年)。底部的面板显示了用抗Gα13的细胞裂解物的Western blot(5%在顶部面板中使用的)。
储存条件
***盒的成分在***盒的有效期限内必须存放于4°C条件下保存。
***(***盒内不提供,由实验者自行配置)
1. 刺激和未刺激的细胞裂解物;
2. 蛋白酶***l剂;
3. 4 °C 摇杆或者摇床;
4. 0.5 M EDTA (pH 8.0);
5. 1 M MgCl2;
6. 2X reducing SDS-PAGE sample buffer;
7. 电泳和免l疫印迹相关***;
8. 免l疫印迹缓冲液TBST (10 mM Tris-HCl,Rac kit, pH 7.4, 0.15 M N***, 0.05%
Tween-20);
9. 免l疫印迹封闭缓冲液 (TBST containing 5% 脱脂奶粉 or 3% BSA);
10. PVDF或硝l酸纤维素膜;
11. 二抗;
12. ECL 检测***;
Arf样蛋白1(Arl1)是GTpases的Ras超家族中的调控性GTPases Arf家族的成员,并且在整个真核生物中都具有高度保守的直系同源***。 Arl1对果蝇和秀丽隐杆线虫的早期胚胎发育至关重要。 Arl1在主要序列,细胞***和功能(膜运输调节)上与Arf1-6较相似,甚至共享几个共同的结合伴侣。 除了其在高尔基体/反式高尔基体网络中的膜运输功能中,还有报道表明Arl1在酵母中的离子稳态中可能发挥作用。
Arf6激l活测定。 经GDP(lane1)或GTPγS(lane 2)处理后,纯化的Arf6蛋白被免l疫沉淀。 用抗活性Arf6单克l隆抗l体进行免l疫沉淀。
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