离子交换柱层析能分离纯化蔗糖酶的主要依据是什么?
目的蛋白带负电荷,和阴离子交换树脂发生离子交换,目的蛋白被挂在柱上,杂蛋白穿透,在洗脱,这样目的蛋白就得到了分离,其实主要利用的是蛋白的两1性点解,缓冲液的ph与等电点的关系
离子交换柱层析能分离纯化蔗糖酶的主要依据是什么?
目的蛋白带负电荷,和阴离子交换树脂发生离子交换,目的蛋白被挂在柱上,杂蛋白穿透,在洗脱,这样目的蛋白就得到了分离,其实主要利用的是蛋白的两1性点解,缓冲液的ph与等电点的关系
层析介质功能基团对生物分离性能的影响
功能基团的物理和化学性能是影响层析介质与目标分子的作用的主要因素,主要决定了生物分离模式并影响其分离的选择性和载量,因此选择合适功能配基及密度尤其重要。另外配基与基球表面距离也会影响其介质的分离性能,配基与基球表面距离可以通过链接配基和基球的手臂分子来调节。
病毒分离纯化的挑战与解决方案
病毒结构通常由蛋白质为衣壳及核酸为内芯组成,其尺寸在20-100纳米之间,与单一蛋白或核酸生物分子相比其结构复杂得多,分子量也大很多。因此用于蛋白分离纯化的层析介质很难满足病毒的分离纯化的要求。主要原因是病毒尺寸大,而传统蛋白分离纯化的介质孔径小,因此病毒在传统层析介质的扩散速度慢,病毒在常规蛋白层析介质上的吸附只限于外表面一薄层区域,导致载量低,并使得病毒在操作中大量失活。为了满足病毒分离纯化需求,纳微开发出三种病毒分离纯化介质及解决方案,分别为超大孔单分散聚合物层析介质用于病毒分离纯化;小粒径无孔层析介质分离纯化病毒;孔径均一的整体柱分离纯化病毒。
层析柱原理
亲和层析原理:利用生物分子之间的专一性识别性或特定的相互作用的分离技术称为亲和分离技术。在该技术中,亲和分离过程是通过引入亲和配基得以实现的。所谓亲和配基,是指具有对生物分子专一识别性或特异相互作用的物质。将亲和配基固定在不同的介质上,可得到不同的亲合分离技术,如固定在层析介质上,达到专一性层析分离的技术称为亲和层析技术。将亲和配基接在分离膜上,得到亲和膜分离技术。