Elispot实验步骤与原理示意 （示意图如下）
大致原理上分为如下7个步骤，详情已具体产品说明书为准
Step.1 包被：将单clone捕获Antibody添加到乙醇处理的PVDF膜板上
Step.2 细胞孵育：在有刺激的情况下加入细胞，孵育，细胞分泌***
Step.3 捕获分泌物：activation后的细胞，分泌的***被周围的Antibody结合捕获
Step.4 检测Antibody：去除细胞，Elispot，清洗平板，加入生物素化的检测Antibody
Step.5 链霉亲和素-酶偶联物：加入链霉亲和素偶联物，保证后续在膜上形成斑点
Step.6 加反应底物：当酶催化时，显色底物形成不溶性沉淀
Step.7 结果分析：在自动点阅读器中对结果进行分析。每个斑点对应一个分析物分泌细胞
全自动酶联斑点图像分析仪
德国biosys厂家的bioreader系列全自动酶联斑点图像分析仪
LED三维均匀照射光源，形成环形立体无影光源，均匀照射；
一体化套装软件：在同一软件中，同步完成斑点图像扫描、斑点计数与数据分析
全自动采集各孔ELISPOT图像、自动计数分析及数据输出功能
样品自动居中，自动***，自动白平衡，镜头自动聚焦，自动光照调节
同步完成96孔板斑点图像采集与计数分析≤2 min
每孔图像扫描和计数速度：≤1.4sec
分析区域：可以是整板、单个孔或者任意选定区域
软件可实现自动的设置计数参数，Elispot原理，自动进行计数；也可根据实验情况调整优化计数参数，手动添加、删除单个斑点或斑点群，进行结果修正。
内置多种细胞因ZI计数参数，可直接调用参考。
量化分析：可根据斑点大小及光密度进行细胞因ZI分泌量化分析（Activities）。
统计学插件EliStat统计分析各孔细胞斑点分布、抗原刺激强弱、细胞因ZI分泌量化比较等
一次性校准，同类板免校准，提高读板速度和水平
对每孔都可以进行统一的或不同的参数设置，一个板上若检测多种细胞因ZI，ELISPOT技术原理及其操作，可以一次性完成计数分析
具备质控功能：利用QC板可对仪器相机、光源等读板条件进行校准，保证斑点判读标准的一致性
软件可升级含全光谱的荧光检测功能，升级荧光通路后可用于检测FluoroSpot
T细胞的ELISpot分析应用：
ELISpot是研究特异性***反应的敏感方法，能够区分活化的T细胞亚群。例如，Th1细胞产生干扰素-γ、IL-2和TNF-α，而Th2细胞产生其他***，如IL-4、IL-5和IL-13。例如，这被广泛应用于infectious disease、cancer、***和自身***性***的研究。
在vaccine研究中，ELISpot是一种标准工具，用于通过测量激发强大T细胞反应的能力(通常是干扰素-γ的分泌)来确定vaccine的有效性。基于ELISpot的诊断分析已经可用，包括一种通过测量T细胞对tuberculosis分枝Bacillus特定抗原的反应分泌干扰素-γ来检测tuberculosis病***患者的测试。
常见疑难问题(图)-B细胞Elispot检测-Elispot由世联博研（北京）科技有限公司提供。世联博研（北京）科技有限公司坚持“以人为本”的企业理念，拥有一支高素质的员工***，力求提供更好的产品和服务回馈社会，并欢迎广大新老客户光临惠顾，真诚合作、共创美好未来。世联博研——您可信赖的朋友，公司地址：北京市昌平区回龙观镇上奥世纪中心2B座6层603，联系人：李经理。