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北京中检维康生物技术有限公司

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手机号码:13581983480
公司官网:www.clovertek.com.cn
企业地址:北京市顺义区牛栏山腾仁路22号闽京蒲工业园3号楼201
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北京中检维康生物技术有限公司(BeijingClovertechLimitedCompany)专注于食品安全检测20年,是国内较早引进国外先进技术和设备并提供专业化技术服务的经济实体。公司经营各种国内外先进实用的食品、农副产品、饲料的检测仪器与试剂盒,分析仪器,生物及化学试剂等,并已申请为国家高新技......

北京中检维康有限公司-酶联ELISA***盒公司

产品编号:1000000000012700470                    更新时间:2022-05-18
价格: 来电议定
北京中检维康生物技术有限公司

北京中检维康生物技术有限公司

  • 主营业务:clover(科乐福),中检维康,fapas,帝强
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李峻峰 13581983480

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产品详情





ELISA***盒的测试要求

做好对照

正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,酶联ELISA***盒公司,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应。

实验条件的选择

在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:

(1)固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。常用的是40孔聚乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,酶联ELISA***盒厂家,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。

(2)包被(或抗原)的选择:将(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。

(3)酶标记工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

(4)酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致***作用,应注意防护。有条件者应使用不致***、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。



Elisa***盒操作步骤

1、固相载体的挑选:许多物质可作为固相载体,如聚乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方式可所以凹孔平板、试管、珠粒等。

2、包被或抗原的挑选:将或抗原吸附在固相载体表面时,湖北酶联ELISA***盒,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。

3、 酶标记作业浓度的挑选:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定。然后再固定其它条件或采取“方阵法",在正式试验体系里准确地滴定其作业浓度。

4、酶的底物及供氢体的挑选:对供氢体的挑选要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。



ELISA***盒的操作方法——双夹心法

1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,酶联ELISA***盒价格,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。

2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

3. 加酶标:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。

4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。

5. 终止反应:于各反应孔中加入2M***0.05ml。

6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。



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