使用广泛的氨基和羧基偶联剂就要数EDC和NHS(Sulfo-NHS)了。大多数情况下,同时使用EDC/NHS的交联于只使用EDC的,表面氨基化原理,NHS的使用能够极大增强偶联效率。但也有个例,表面氨基化,比如2012年的一篇工作(Diagnostics (Basel). 2012 Aug 27;2(3):23-33.),他们在APETS修饰的金芯片和96孔板表面组装一抗,发现单独使用EDC比同时使用EDC/NHS和EDC/Sulfo-NHS都。





***芯片(genechip)(又称DNA芯片、生物芯片)的原型是80年代中期提出的。***芯片的测序原理是杂交测序方法,即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法,在一块基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探针。当溶液中带有荧光标记的核酸序列TATGCAATCTAG,与***芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时,通过确定荧光强度强的探针位置,表面氨基化的方法,获得一组序列完全互补的探针序列。据此可重组出靶核酸的序列。
在每根光纤的顶部蚀刻出一个小洞,表面氨基化的意义,可镶嵌直径为3um的微磁珠。每个微磁珠上可以根据不同的需求连接不同的配体,如寡核苷酸、蛋白质、***等。制作芯片时,将带有所需配体的不同微磁珠混合后与光纤束进行自组装,通过微珠上寡核苷酸标签序列(address) 确认每根光线上所吸附的不同的微珠。现有微珠芯片上每束光纤可镶嵌1536种微珠,因此,每种微珠在一束光纤中有30次重复。结合在微珠上的寡核苷酸或者蛋白可与荧光标记的配对核酸或配体发生相互作用,发生的信号被激发后通过光纤传递到检测器。
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