细胞培养中常见的污染及解决方法
***污染
***污染后，培养基一般清澈，保持原色。细丝可以在显微镜下观察到。，一些***类似于死细胞碎片，但其中许多清晰可见，看起来像珊瑚，比较容易区分。此外，它们会慢慢长出细细的黑色细丝，因为它们生长得比较慢，不像***那样容易被发现，一旦发现培养基被污染，它们将很难存活。
解决方法：一旦被***污染，细胞实验外包，果断丢弃，然后对细胞房、CO2 培养箱、器皿和培养基进行消毒。
关于细胞培养的常见问题
Q：培养液到底要不要加双抗（青&链）？
A：双抗不是细胞生长必需的。我们培养细胞时不常规使用，因为连续使用会促进耐药性细胞株的产生，导致轻度污染持续存在。一旦将从培养液中去除，这种轻度污染终将发展成为大规模污染。具体情况，可根据自己实验室的环境，自行决定是否使用双抗。
Q：细胞培养，能更换成其它种类的培养基吗？
A：我们强烈建议好使用细胞提供机构或细胞库推荐的生长培养液。有些细胞可能会适应在不同培养基中生长，在做好保种的条件下，可以分出部分细胞做测试。
大鼠脂肪的分离
将***切取的大鼠脂肪***尽量剪碎后移至离心管，细胞，其余步骤与人脂肪的分离一致。
经***切除获得的大鼠皮下脂肪***消化后原代培养24 h，且肉眼观察会发现培养瓶底部贴附着一层网状薄膜，轻轻摇晃培养瓶可使这层网状薄膜从瓶壁上脱落，细胞分化，镜下观 察发现大部分细胞都附着于这层膜上，流式细胞实验，通过术获取的人脂肪***消化后则无此现象。增加胶原酶的量和消化时间也无法避免，取材时的或脂肪间结缔***未被完全消化，穿过细胞筛进入了培养瓶并沉淀于瓶底部形成的。胶原蛋白酶虽然可以特异性水解胶原蛋白的三维螺旋结构，但不会损伤其他蛋白质。处理方法是37 ℃下用胰蛋白酶 消化5 min。然后利用40 μm的细胞筛过滤后传代。 根据作者的经验，每毫升***切除的大鼠脂肪可分离基质血管成分细胞约1.81×106个。原代培养2.24×10^7个大鼠基质血管成分细胞，40 h后传代时约剩余 6.2×10^6个细胞，细胞剩余率27%。
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