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北京立博泰业科技有限公司

普通会员4
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企业地址:北京市海淀区天秀路10号中国农大国际创业园3号楼5层5046
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北京立博泰业科技有限公司位于北京市海淀区中国农大国际创业园,是集高新技术研发和科研仪器研发销售为一体的高科技专业公司,是由具有多年高新技术研发和高新技术企业运营经验的专业人士创办。公司于2016年被认定为国家高新技术企业和中关村高新技术企业,公司以高新技术研发为己任,由多位博士和硕士组成研发团队,依......

北京立博泰业-MIRAWLRN8206KIT***盒批发

产品编号:1000000000012777370                    更新时间:2022-05-20
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北京立博泰业科技有限公司

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  • 主营业务:恒温快速扩增**盒,恒温荧光扩增仪
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恒温扩增***盒有哪些常用酶

TMA相关酶

依赖转录介导扩增(Transcription mediated amplification, TMA)的扩增模板为RNA或单链DNA,检测的扩增产物为RNA,详细原理可参考转录介导的核酸扩增技术小结。该体系所用酶有两种:M-MLV逆转录酶:用于模板RNA逆转录成DNA,并在逆转录过程中通过引物引入转录启动子序列,用于后续转录过程;T7 RNA聚合酶:以逆转录形成的DNA为模板,转录合成检测产物RNA。



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尿DNA糖基化酶尿DNA糖基化酶(UDG酶)又称尿-N-糖基化酶(UNG酶),可水解含尿的单链和双链DNA释放出游离尿,而对RNA无活性,与dUTP搭配使用,可建立成PCR防污染体系。其原理如下:在PCR体系中将dTTP部分或全部替换为dUTP后,使得反应生成含有dU碱基的扩增产物,这些扩增产物不同于天然模板,在进入含有UDG酶的反应体系时,可被UDG酶识别并切割尿碱基与糖磷酸骨架间的N-糖基键,而经切割后的DNA链在碱性或高温条件下易于断裂降解,试纸条型WLRN8206KIT***盒批发,从而失去被当作模板再扩增的能力,因此可防止扩增子污染(如下图)。市面上的UDG酶主要有普通型和热敏型,其中热敏型UDG酶在室温条件下即可催化反应,50℃以上加热可使其灭活,防止其降解后续PCR形成的含dU扩增产物。虽然UDG/dUTP体系具有防污染功能,但在实际测试中还得兼顾PCR的效率和灵敏度。一方面需确保PCR扩增产物掺入足够量的尿碱基,从而可被UDG有效切割;另一方面也需要保证反应体系添加的dUTP不会明显影响PCR效率,WLRN8206KIT***盒批发,因此dTTP和dUTP的佳比例需通过优化确定。



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RPA相关酶

重组酶聚合酶扩增技术(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)是一种多酶协作的反应体系,详细原理可参考充满想象力的恒温扩增技术:RPA、RCA、SDA、HDA。该体系反应酶包含三种:重组酶:可与引物结合形成复合体,MIRAWLRN8206KIT***盒批发,***至与引物同源的靶序列,促使引物与模板结合,同时帮助DNA解链,以便启动扩增;单链DNA结合蛋白:可与被置换出的DNA单链结合,稳定单链结构;DNA聚合酶:如Bsu DNA聚合酶,用于DNA链合成,同时具有链置换功能。对于RNA模板,需在反应中加入逆转录酶形成RT-RPA体系;若利用标记探针进行检测,还需加入核酸酶对探针序列进行切割,常用核酸酶有核酸内切酶 IV(Endonuclease IV, nfo)和核酸外切酶 III(Exonuclease III, exo),或者可与CRISPS/Cas系统搭配使用。



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