




恒温扩增***盒设计及储存
荧光探针设计:
在上下游引物中间,设计- -段长度为46-52nt与目的片段互补的序列作为荧光探针;
探针序列不与特异性引物识别位点重叠,荧光型恒温快速扩增***盒,长度为46-52 nt ,序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基。
***盒储存:
运输条件:低温运输;
储存条件:储存温度≤-20°C ,避光保存,避免重压、反复冻融:
产品有效期: 12个月。
恒温扩增***盒操作步骤
提前30分钟将***盒所需组分取出,荧光型恒温快速扩增***盒代理商,室温融化。鹿荡混匀。
1).每个干粉反应管加入29.4 uL Abuffer (注意: Abuffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产“生影响) ; 1.每个干粉反应管加入29.4 uLAbuffer (注意: Abuffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产生影响) ;
2.每个反应管分别加入2 uL上游引物、2 uL下游引物和0.6 μ探针(引物和探针浓度为10 μM ,荧光型恒温快速扩增***盒批发,对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中)
恒温扩增常用酶
恒温扩增的方法多种多样,其对应的酶体系也各有差别,且一般为多酶体系,在酶原料选择上相比PCR复杂,下面只列举一些主要的恒温扩增方法相关酶。
LAMP相关酶环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)所用酶主要为具有链置换功能的DNA聚合酶,详细原理可参考聊聊恒温扩增技术。常用酶为Bst DNA聚合酶,荧光型恒温快速扩增***盒价格,用于DNA链合成,同时具有链置换功能;若检测模板为RNA,则可加入逆转录酶配制成RT-LAMP反应体系。
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