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恒温扩增***盒有哪些常用酶

TMA相关酶

依赖转录介导扩增(Transcription mediated amplification， TMA)的扩增模板为RNA或单链DNA，检测的扩增产物为RNA，详细原理可参考转录介导的核酸扩增技术小结。该体系所用酶有两种：M-MLV逆转录酶：用于模板RNA逆转录成DNA，并在逆转录过程中通过引物引入转录启动子序列，用于后续转录过程；T7 RNA聚合酶：以逆转录形成的DNA为模板，转录合成检测产物RNA。

恒温扩增***盒操作步骤

提前30分钟将***盒所需组分取出，室温融化。鹿荡混匀。

1).每个干粉反应管加入29.4 uL Abuffer (注意: Abuffer需完全融化混匀，否则会对实验效果产“生影响) ; 1.每个干粉反应管加入29.4 uLAbuffer (注意: Abuffer需完全融化混匀，否则会对实验效果产生影响) ;

2.每个反应管分别加入2 uL上游引物、2 uL下游引物和0.6 μ探针(引物和探针浓度为10 μM ，对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中) 

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逆转录酶逆转录酶又称反转录酶，是一种RNA介导的DNA聚合酶，DNA型WLRB8204KIT***盒报价，其反应过程中体现出三种功能为：以RNA作为模板合成互补DNA链 (complementary DNA， cDNA)，形成RNA:cDNA杂交链；发挥RNase H活性，DNA型WLRB8204KIT***盒价格，降解RNA:DNA杂交链中的RNA模板；以cDNA作为模板合成第二链DNA，形成双链DNA（如下图）。其中，DNA型WLRB8204KIT***盒，RNaseH活性是逆转录酶的一个内在特性，可在合成过程中同时切割RNA:cDNA杂合链中的RNA模板，该特性可能降低逆转录效率，DNA型WLRB8204KIT***盒代理商，因此在实际应用中，常采用人工改造后的低或无RNase H活性的逆转录酶。常用的逆转录酶有AMV和M-MLV，AMV分离自禽类成髓细胞瘤病毒(***ian Myeloblastosis Virus， AMV)，M-MLV逆转录酶分离自莫洛尼氏鼠病毒(Moloney Murine Leukemia Virus， MMLV)，前者热稳定性优于后者，但AMV逆转录酶的RNaseH活性也更强，不利于长片段cDNA合成。市面上多使用经***工程改造过的M-MLV逆转录酶，其热稳定性改进，可在50℃左右工作，同时RNase H活性进一步减弱，提高了其逆转录效率。