TwistAmp公司-北京立博泰业公司

TwistDx***盒的相关概述

RPA 作为颠覆 PCR 的革命性方法的突出地位源于其特定的反应成分（表 1）和机制。 对于成功的 RPA 分析，进口TwistAmp公司，细微差别取决于内在因素、引物、探针和核酸模板的设计； 并且与外在因素有关，进口TwistAmp公司，如反应温度和搅拌、对错配的耐受性、和模板DNA。 此外，RPA 过程中的核酸标记、RPA 扩增子纯化和扩增后处理也是 RPA 检测成功的重要细节。 本节提供从 RPA 文献中总结的这些实用信息，作为 RPA 检测设计的指南。

即用型RPA检测***盒

客户采用RPA技术，TwistAmp公司，可以根据自身需求开发自己的检测方法。在不同开发阶段所提供的这些即用型***盒内含有一整套用于检测主要食物病原体靶标的通用RPA***组分，灵活易用。

TwistDx公司曾经开发出系列即用型RPA检测***盒。例如，TwistAmp? exo +***盒为用户提供了一个exo***盒，加上用于实时荧光检测的引物探针及阳性模板，该模板可与每次检测反应配合使用。TwistGlow? 沙门氏菌（即用型，可用于实时荧光检测）和 TwistFlow? 沙门氏菌（即用型，可用于终点侧流检测）***盒均为用户提供包含靶***及内部质控引物探针反应组分、一个两步走的细胞裂解样本制备方法，以及可与每次***盒反应配合使用的模板。

目前，TwistDx公司在被雅培收购后，停产了部分产品，包括：TwistAmp Basic RT***盒、TwistAmp exo RT***盒、TwistAmp Liquid Basic RT ***盒和TwistAmp Liquid exo RT***盒、食品安全***盒（包括TwistAmp exo 弯曲菌属检测***盒（TwistAmp exo +Campylobacter）、TwistAmp exo 单核细胞李斯特菌检测***盒（TwistAmp exo +ListeriaM）、TwistGlow?沙门氏菌检测***盒（TwistGlow?Salmonella）和TwistFlow 沙门氏菌检测***盒（TwistFlow?Salmonella ）共四种）。

RPA技术的基本原理

RPA技术主要依赖于三种酶：能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性，反应温度在37°C左右。

重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物，进口TwistAmp公司，能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物***了同源序列，就会发生链交换反应形成并启动DNA合成，对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合，防止进一步替换。在这个体系中，由两个相对的引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快，一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物。RPA扩增的基础体系(TwistAmp? Basic)含有DNA扩增所需的所有***，我们只要准备好引物和模板就行。扩增结果可以通过凝胶电泳进行终点检测，产物纯化后可用于下游研究。

在这个基础体系中添入不同的酶和探针，就可以实现多样化的RPA应用。举例来说，TwistAmp? exo结合了的exo探针技术和核酸外切酶III，能实现数据的实时读取，就像荧光定量PCR一样。不过反应终点的扩增子总量有所减少，适合获得强荧光信号进行动力学分析，不适合终点检测(比如跑胶)。将exo探针技术、核酸外切酶III和逆转录酶结合起来，可以一步实现RNA模板的实时扩增。